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HPLC法测定发芽糙米中γ—氨基丁酸含量试验

2017-06-27赵海波

农业科技与装备 2017年3期
关键词:高效液相色谱

赵海波

摘要:建立测定γ-氨基丁酸的高效液相色谱分析方法,测定不同蒸煮发芽糙米中的γ-氨基丁酸含量。试验结果表明:与未蒸煮相比,蒸煮20 min的发芽糙米中的γ-氨基丁酸含量最高,增加率为66.30%。

关键词:高效液相色谱;γ-氨基丁酸;发芽糙米;检测波长

中图分类号:S511 文献标识码:A 文章编号:1674-1161(2017)03-0050-02

发芽糙米是将糙米发芽至一定芽长得到的芽体,相当于将糙米活化,其芽体具有旺盛的生命活力。发芽后的糙米不仅品质有所提升,而且含有多种生物活性物质,如植酸、γ-氨基丁酸、γ-谷维素等。γ-氨基丁酸又名氨酪酸,具有改善神经机能、增强肝功能、防止动脉硬化、调节肾功能、预防肥胖等多种生理活性能。利用高效液相色谱建立γ-氨基丁酸快速分析方法,完成色谱条件的优化并对不同蒸煮时间发芽糙米中γ-氨基丁酸的含量进行测定。

1 材料与方法

1.1 仪器与设备

Agilent 1260高效液相色谱仪;AR224CN型分析天平:奥豪斯仪器(上海)有限公司;pHS-3CW型pH计:上海般特仪器制造有限公司;SL-250A高速多功能粉碎机:浙江省永康市松青五金厂;TDL-5-A低速台式大容量离心机:上海安亭有限公司。

1.2 液相色谱工作条件

色谱柱:Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18(250 mm×4.6 mm×5 μm);流动相B:纯乙腈;流动相D:浓度为0.025 mol/L,pH为5.90±0.05的乙酸钠溶液;紫外检测器:发射波长332 nm;柱温:40 ℃;进样量:10 μL;流速:0.5 mL/min;梯度洗脱程序如表1所示。

1.3 标准曲线绘制

配制浓度分别为20,40,60,80,100 mg/L的γ-氨基丁酸标准溶液。依次取上述溶液1 mL,加入1 mL的邻苯二甲醛衍生试剂,充分混匀,衍生反应2 min后过滤,依次测定并绘制标准曲线。

1.4 样品溶液制备

精确称取3 g制备好的发芽糙米粉,溶于50 mL浓度为60%的乙醇中,在50 ℃水浴振荡1 h,再以

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