RORα高表达对二烯丙基二硫抑制人胃癌MGC803细胞上皮-间质转化的影响
2017-06-22赵晓红
夏 红,苏 坚,2,赵晓红,3,刘 芳,苏 波,凌 晖,曾 希,苏 琦
1.湖南省胃癌研究中心,湖南省高校肿瘤细胞与分子病理学重点实验室,南华大学肿瘤研究所,湖南 衡阳 421001;2.南华大学附属第二医院病理科,湖南 衡阳 421001;3.海南省妇幼保健院妇产科,海南 海口 570206
RORα高表达对二烯丙基二硫抑制人胃癌MGC803细胞上皮-间质转化的影响
夏 红1,苏 坚1,2,赵晓红1,3,刘 芳1,苏 波1,凌 晖1,曾 希1,苏 琦1
1.湖南省胃癌研究中心,湖南省高校肿瘤细胞与分子病理学重点实验室,南华大学肿瘤研究所,湖南 衡阳 421001;2.南华大学附属第二医院病理科,湖南 衡阳 421001;3.海南省妇幼保健院妇产科,海南 海口 570206
背景与目的:二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)具有抗肿瘤的作用。该研究在DADS上调人胃癌MGC803细胞RORα的基础上,观察DADS与RORα高表达对MGC803细胞上皮-间质转化(epithelialmesenchymal transformation,EMT)的影响。方法:相差显微镜观察MGC803细胞形态的影响。采用反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)、蛋白[质]印迹法(Western blot)、免疫荧光与免疫组织化学检测EMT相关分子表达。裸鼠实验检测对移植瘤生长的影响。结果:相差显微镜显示,DADS组与RORα高表达组细胞大小较MGC803细胞一致,呈圆形或椭圆形,梭形细胞少见,异型性降低。RORα高表达加DADS后,上述改变更为明显。Western blot检测结果显示,DADS组与RORα高表达组Snail蛋白表达明显下调,DADS+RORα高表达组更明显(P<0.05)。RT-PCR与Western blot检测显示,DADS与RORα高表达可明显下调Vimentin和上调E-cadherin mRNA与蛋白表达,DADS+RORα高表达组更为显著(P<0.05)。免疫荧光显示,DADS组与RORα高表达组细胞Snail与Vimentin表达较对照组明显减弱和E-cadherin表达显著增强,DADS+RORα高表达组更为显著,与Western blot结果一致。裸鼠实验显示,DADS组、RORα高表达组与RORα高表达+DADS组移植瘤较对照组生长减慢(P<0.05),并且,移植瘤体重较对照组明显降低,抑瘤率分别为15.07%、26.55%与49.27%(P<0.05)。免疫组织化学检测结果显示,DADS组、RORα高表达组与RORα高表达+DADS组较对照组的Ki-67、CD34与Vimentin表达均明显降低,E-cadherin表达明显增强。结论:RORα高表达可增强DADS体内外抑制人胃癌细胞EMT的作用。
二烯丙基二硫;RORα;人胃癌MGC803细胞;上皮-间质转化;Snail;Vimentin;E-cadherin
胃癌是最常见的恶性肿瘤之一,发生率与死亡率分别为全球第四位与第三位。据2015年最新统计,胃癌在我国的发生率与死亡率位于第二位,每年约新发67.9万和死亡49.8万人。由于患者就诊时大多已发生侵袭转移,5年生存率低于10%[1-3]。……
