赵瑞杰， 王 坤， 刘雅林， 杨银锋， 李喜朋， 孙 莉， 程 焱

羟基红花黄色素A对脑组织蛋白质羰基化影响的体外研究

赵瑞杰1， 王 坤2， 刘雅林1， 杨银锋1， 李喜朋1， 孙 莉3， 程 焱3

目的 研究羟基红花黄色素A(HSYA)对体外ONOO-途径和亚铁血红素/亚硝酸钠/过氧化氢(heme/NaNO2/H2O2)途径引起脑组织蛋白质羰基化的影响。方法 分别模拟体内ONOO-、heme/NaNO2/H2O2羰基化途径，以脑组织蛋白为羰基化底物，分为空白对照组、对照组及低、高浓度组(以HSYA 0.1 mmol/L、1 mmol/L干预)。以2、4-二硝基苯肼(2、4-dinitrophenylhydrazine，DNPH)法检测蛋白质羰基化水平。结果 ONOO-途径和heme/NaNO2/H2O2途径均可以增加脑组织匀浆中羰基蛋白的含量。HSYA预处理可浓度依赖性地降低ONOO-途径诱导的蛋白质羰基化水平，低、高浓度组羰基蛋白含量分别降低了26.13%、46.23%，差异有统计学意义(F= 14.265，P<0.05)。HSYA预处理对体外heme/NaNO2/H2O2途径诱导的蛋白质羰基化没有明显抑制作用，差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HSYA可剂量依赖性地抑制ONOO-途径在体外对脑组织蛋白的羰基化修饰；提示HSYA抑制蛋白质羰基化反应可能是其对抗脑血管疾病与神经系统变性疾病的分子机制之一。

羟基红花黄色素A； 过氧亚硝基离子； 亚铁血红素； 蛋白质羰基化

氧化应激状态下，机体内氧化系统与抗氧化防御系统的平衡遭到破坏，体内生成过多的高活性分子如活性氧自由基(reactire oxygen species，ROS)和活性氮自由基(reactive nitrogen species，RNS)超过了细胞内抗氧化剂的代偿能力，从而引起蛋白质氧化和组织损伤[1]。蛋白质氧化损伤伴随着蛋白质羰基的形成，而蛋白质羰基化已被广泛认为是蛋白质氧化的生物学标志[2]。研究表明，过氧亚硝基离子(peroxynitrite，ONOO-)依赖途径和亚铁血红素/亚硝酸钠/过氧化氢(heme/NaNO2/H2O2)途径是体内蛋白质羰基化的两条通路[3]。……