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槌果藤对体外诱导Th17细胞增殖及RORγt转录水平的影响

2017-06-08王姗姗梁沛君应旭旻

浙江中西医结合杂志 2017年5期
关键词:剂量检测

王姗姗 梁沛君 应旭旻

槌果藤对体外诱导Th17细胞增殖及RORγt转录水平的影响

王姗姗1梁沛君2应旭旻3

目的观察槌果藤对体外诱导的TH17细胞增殖和分化的影响。方法将不同浓度的槌果藤乙醇提取物与Th17细胞共同培养,应用流式细胞术(FCW)检测空白对照组及槌果藤低、中、高剂量组(1、10、20μg/mL)TH17细胞分化水平;进而以10μg/mL浓度为基础药物浓度,采用聚合酶链式反应(PCR)检测槌果藤对维甲酸相关孤儿受体γ(RORγt)转录水平表达的影响。结果FCW检测结果显示,培养3天后,与空白对照组比较,槌果藤中、高剂量组Th17细胞分化比例明显降低[(4.83±0.13)%、(4.99±0.38)%比(8.24±0.34)%,P<0.05];低剂量组与对照组、中剂量与高剂量组Th17细胞分化比例比较差异无统计学意义(P>0.05)。PCR检测结果显示,单纯槌果藤组(10μg/mL)与对照组相比,RORγt转录表达水平明显降低[(0.66±0.25)比1,P<0.05];单纯槌果藤组与ERK抑制剂组相比,RORγt转录表达水平明显降低[(0.66±0.25)比(1.46±0.47),P<0.05)]。P38抑制剂组、JNK抑制剂组与单纯槌果藤组相比,RORγt转录表达水平无显著差异(P>0.05)。结论槌果藤可抑制体外诱导Th17细胞的增殖、分化,其作用机制可能是通过ERK信号通路从而抑制RORγt转录。

槌果藤;Th17;RORγt;增殖;分化

T辅助细胞17(T helper 17 cell,Th17)是新近发现的一种由转化生长因子-β(TGF-β)和白介素-6(IL-6)联合诱导产生的能分泌IL-17A、IL-17F、IL-22等细胞因子的CD4+T细胞,它与调节性T细胞共同参与自身免疫疾病的过程,研究发现,自身免疫疾病的Th17细胞明显升高,而其数量的升高与自身免疫病呈密切相关[1-2],系统性红斑狼疮(systemic lupuserythematosus,SLE)患者外周血Th17细胞数量的升高与疾病活动度明显相关[3]。既往研究[4]表明,槌果藤对局灶节段肾小球硬化(FSGS)小鼠模型可减少尿蛋白,起到免疫调节、抗氧化、抗纤维化作用,但其作用机制有待进一步研究。本实验旨在研究槌果藤提取物对Th17细胞的增殖、分化的影响,并对其可能存在的作用机制进行初步探讨,为槌果藤治疗自身免疫疾病提供更多的理论依据。……

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