赵东晓 陈弘磊 孟冠敏 李芳琼 王伟

低浓度雷公藤甲素联合顺铂对肝癌细胞HepG2活性的影响

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目的探讨低浓度雷公藤甲素与顺铂联合用药对人肝癌细胞HepG2活性的影响，及其逆转顺铂耐药的可能机制。方法将人肝癌细胞HepG2分为顺铂单用组和雷公藤甲素加顺铂联合用药组。顺铂单用组分别用浓度为0、2.5、5、10、20、40μg/mL的顺铂处理，联合用药组同时联合低浓度雷公藤甲素（12.5ng/mL）处理HepG2。CCK-8法检测HepG2细胞增殖的抑制率；流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞内P糖蛋白的表达。结果顺铂单用组各浓度（0、2.5、5、10、20、40μg/mL）对肝癌细胞HepG2细胞活力24h的抑制率分别为0、（4.0±1.0）%、（9.7±1.1）%、（29.4±2.4）%、（47.5±2.5）%、（62.9±1.2）%，联合用药组24h抑制率分别为（4.7±1.0）%、（37.1±3.1）%、（44.1±3.5）%、（57.9±3.0）%、（66.9±2.0）%、（74.9±2.0）%，两组比较，细胞活力抑制率差异有统计学意义（P<0.01）；Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡后发现，顺铂单用组（0、5、10、40μg/mL）诱导HepG2肝癌细胞早期凋亡率分别为（4.3±0.3）%、（8.4±0.3）%、（9.6±0.3）%、（32.3±2.0）%，而联合用药组细胞早期凋亡率分别增加至（9.6±0.4）%、（16.2±0.2）%、（23.2±0.5）%、（53.0±3.6%），两组比较，细胞凋亡率差异有统计学意义（P<0.01）；PE单染检测P糖蛋白后发现，顺铂单用组（0、5、10、40μg/mL）细胞内P糖蛋白表达率分别为（37.3±0.4）%、（34.2±0.5）%、（30.1±1.1）%、（34.2±2.3）%，无明显变化，而联合用药组P糖蛋白的表达率分别降低至（25.0±1.8）%、（18.6±0.7）%、（8.9±0.3）%、（1.8±0.1）%，两组P糖蛋白表达差异有统计学意义（P<0.01）。结论雷公藤甲素与顺铂联合用药可以显著抑制人肝癌HepG2的增殖并诱导凋亡，同时调节HepG2的顺铂耐药性，其作用机制可能与P糖蛋白下调相关，从而对肝癌细胞HepG2发挥抗肿瘤作用。

肝癌细胞；HepG2；雷公藤甲素；顺铂；耐药；P糖蛋白

肝癌是死亡率仅次于胃癌、食道癌的第三大常见恶性肿瘤。肝癌患者对于化疗药物的耐药是导致治疗失败、影响肝癌治愈率和远期生存率的主要原因[1]。顺铂作为肝癌的基本化疗药，是一种作用于细胞周期的非特异性药物，但易产生耐药性，其有效率只有20%～40%[2]。研究证明，由多药耐药蛋白P糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）介导的药物泵出增多、细胞内药物浓度降低在多种抗肿瘤药物耐药中存在，顺铂耐药也与P-gp的表达有着一定的关系[3]。雷公藤甲素（triptolide，TP）是从雷公藤中提取的活性较高的环氧二萜内酯化合物，具有良好的抗炎和抗肿瘤效果，它与目前临床应用的一些抗肿瘤药物具有协同效应，可以多靶点、多途径、交叉发挥抗肿瘤作用[4-5]。……