曹蓉蓉，马俊玥，李淑慧，马 玉，吴佩玲

(新疆医科大学第二附属医院口腔科，乌鲁木齐 830063)

TNF-α对鼠根尖乳头干细胞增殖及多向分化能力的影响*

曹蓉蓉，马俊玥，李淑慧，马 玉，吴佩玲△

(新疆医科大学第二附属医院口腔科，乌鲁木齐 830063)

目的 研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对鼠根尖乳头干细胞(SCAP)增殖及多向分化能力的影响。方法 采用酶消化法结合组织块法获得SCAP，将细胞分为实验组(TNF-α浓度为5、10、20、50 ng/mL)和对照组(TNF-α浓度为0 ng/mL)，使用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测SCAP的增殖能力；采用茜素红染色及实时定量PCR(qRT-PCR)检测TNF-α对SCAP成骨/成牙本质能力的影响；油红O染色检测TNF-α对SCAP成脂能力的影响；qRT-PCR检测TNF-α对SCAP血管相关基因表达的影响。结果 体外培养SCAP符合间充质干细胞来源的特征且具有多向分化能力。MTT结果显示：与对照组相比，各浓度组均能促进SCAP增殖(P<0.05)，其中10 ng/mL TNF-α的促进作用最为明显。茜素红染色结果显示：实验组随着TNF-α浓度的增加，矿化结节逐渐变小，形成数量也逐渐变少。qRT-PCR结果显示：3、7 d时，与对照组相比，实验组骨钙蛋白(OC)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、牙本质基质蛋白-1(DMP-1)表达量降低，3 d时两组OC、DMP-1比较差异有统计学意义(P<0.05)；7 d时DMP-1比较差异有统计学意义(P<0.05)；14 d时，实验组OC、DMP-1表达量明显降低(P<0.05)。油红O染色结果显示：与对照组相比，实验组随着TNF-α浓度的增加，脂滴形成数量逐渐减少。qRT-PCR结果显示：3、7天时，与对照组相比，血管生成素1、血管内皮生长因子A、血小板内皮细胞黏附分子-1表达量明显降低(P<0.05)。结论 炎性因子TNF-α对SCAP的增殖有明显促进作用但同时不同程度抑制SCAP多向分化能力。

干细胞；分生组织；肿瘤坏死因子α；根尖乳头干细胞；多向分化；大鼠，Wistar

2006年，Sonoyama等[1]从人未发育完全的第三磨牙根尖乳头组织中分离出新的间充质干细胞，命名为根尖乳头干细胞(stem cells from apical papilla，SCAP)，并证实其具有高度的增殖、自我更新和多向分化潜能，并在一定的诱导条件下可向成骨/成牙本质、脂肪、软骨、肌肉、神经元等细胞分化。近年来，随着人们对SCAP的深入研究，证实SCAP在介导牙本质再生及牙根发育过程中发挥着极其重要的作用[2]。牙髓炎、根尖周炎是一种复杂的炎症反应，其中包含以肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)为主的多种炎性因子，且炎症的病变程度与炎性因子的水平存在着一定的相关性[3]。有研究结果显示，炎症微环境会影响干细胞的增殖和分化，甚至引起细胞凋亡[4]；……