宋 悦，米荣升，赵 权，薛方民，苏庆美，黄 燕，游艳敏，陆 珂，韩先干，陈兆国

（1.吉林农业大学动物科学技术学院，长春 130118；2.中国农业科学院上海兽医研究所 农业部动物产品质量安全生物性危害因子风险评估实验室（上海） 农业部动物寄生虫学重点开放实验室，上海 200241；3. 山东英才学院，济南 250104；4. 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，扬州 225009）

·研究论文·

泰泽隐孢子虫CP15基因的原核表达及抗血清制备

宋 悦1,2，米荣升2,4，赵 权1，薛方民3，苏庆美2，黄 燕2,4，游艳敏2，陆 珂2,4，韩先干2，陈兆国2,4

（1.吉林农业大学动物科学技术学院，长春 130118；2.中国农业科学院上海兽医研究所 农业部动物产品质量安全生物性危害因子风险评估实验室（上海） 农业部动物寄生虫学重点开放实验室，上海 200241；3. 山东英才学院，济南 250104；4. 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，扬州 225009）

将泰泽隐孢子虫（Cryptosporidium tyzzeri）CP15基因从pMD18-T-CP15重组质粒中切下，连接至pET-28a(+)原核表达载体，经酶切和测序鉴定正确后，转化到大肠埃希菌BL21（DE3）中进行诱导表达，表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析，并将纯化的重组蛋白免疫ICR小鼠制备多克隆抗体。结果显示，重组表达载体pET-28a-CP15在大肠杆菌中以可溶形式表达，表达蛋白分子量约为17 kDa。Western blot显示重组蛋白能被泰泽隐孢子虫感染小鼠血清所识别。ELISA结果显示重组蛋白免疫小鼠血清能和泰泽隐孢子虫卵囊可溶性抗原特异性反应，表明获得的重组蛋白具有较好的抗原性。

泰泽隐孢子虫；CP15；原核表达；多克隆抗体

1 材料与方法

1.1 实验材料 TaKaRa LA Taq酶、T4 DNA连接酶、限制性内切酶EcoR Ⅰ、Hind Ⅲ购自TaKaRa公司；……