鸡源ADAR2基因克隆及其抗新城疫病毒作用研究
2017-06-05张耀丹李继红刘开春孟春春孙英杰宋翠萍仇旭升
张耀丹,汪 伟,李继红,刘开春,孟春春,孙英杰,谭 磊,宋翠萍,廖 瑛,仇旭升,丁 铲
·研究论文·
鸡源ADAR2基因克隆及其抗新城疫病毒作用研究
张耀丹,汪 伟,李继红,刘开春,孟春春,孙英杰,谭 磊,宋翠萍,廖 瑛,仇旭升,丁 铲
目前对家禽中双链RNA特异性腺苷脱氨酶(adenosine deaminase acting on double-stranded RNA, ADAR)的种类、组织分布及其功能尚不明了。本研究中以刀豆素、poly I:C以及新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)作为刺激物诱导鸡胚成纤维细胞(chicken embryo fibroblast,CEF)中ADARs基因上调,扩增获得鸡ADAR2基因的mRNA。为了鉴定ADAR2的抗病毒作用,本研究构建了能够偶联有绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的ADAR2重组真核表达质粒,转染DF1细胞,结果显示在过量表达ADAR2的细胞中,NDV的增殖受到了显著抑制,表明ADAR2在NDV感染过程中发挥重要的抗病毒作用,这为进一步研究鸡RNA编辑酶对NDV RNA编辑奠定了基础。
鸡双链RNA特异性腺苷脱氨酶基因;新城疫病毒;RNA编辑;抗病毒作用
双链R NA特异性腺昔脱氨酶(adenosine deaminase acting on double-stranded RNA,ADAR)基因家族广泛存在于从线虫到人的各种生物细胞中,因其所编码的RNA编辑酶可作用于特定双链RNA结构和mRNA前体,引起腺苷发生脱氨基变成肌苷(A→I)而得名,这一现象被命名为“RNA编辑”,最早在20世纪90年代初由Sommer等[1]在谷氨酸受体蛋白mRNA前体上发现。“RNA编辑”是一种不同于传统的蛋白翻译途径的独特的基因组的转录后修饰过程。宿主细胞在转录过程中通过RNA编辑酶可以对RNA进行加工,如插入、删除或取代一些核苷酸残基,产生不同于模板DNA的RNA,编码蛋白的同功异构体,从而大幅度增加编码蛋白质的多样性。目前,已经在哺乳动物中发现4个ADARs成员[2]:ADAR1、ADAR2、ADAR3及TENR(testis-expressed RNA-binding protein),其中ADAR1、2在中枢神经系统高表达;……
