马 瑞， 徐 玲， 曲秀娟， 车晓芳， 郭天舒， 刘云鹏

(中国医科大学 附属第一医院，辽宁 沈阳 110001)

维罗非尼联合爱必妥对结直肠癌细胞株的作用研究

马 瑞， 徐 玲， 曲秀娟， 车晓芳， 郭天舒， 刘云鹏*

(中国医科大学 附属第一医院，辽宁 沈阳 110001)

探讨BRAF抑制剂维罗非尼联合EGFR单克隆抗体西妥昔单抗对BRAF突变型和野生型结直肠癌细胞株的作用。应用MTT法检测，将不同浓度西妥昔单抗、维罗非尼单药以及两药联合分别作用于BRAF突变型结直肠癌细胞株RKO、HT-29和BRAF野生型结直肠癌细胞株DIFI、CACO-2后，观察各细胞株增殖变化；通过集落形成实验，经过长时间培养细胞验证不同处理因素对细胞增殖的抑制作用；Western blot实验检测EGFR下游通路靶蛋白的活性在两药联合后是否出现明显下调。结果显示，单药治疗，西妥昔单抗能一定程度抑制BRAF野生型结直肠癌细胞株增殖，抑制率达26%～40%，而BRAF突变组两种细胞株对西妥昔单抗均耐药。维罗非尼对不同基因状态细胞的增殖均有一定的抑制作用，IC50均小于7 μmol/mL，其中BRAF突变细胞更为敏感。对比单药西妥昔单抗，联合维罗非尼后更加明显地抑制了细胞增殖，4种细胞存活率均明显降低(P<0.05)。长时间集落形成实验证实两药联合形成集落的面积和数量均明显减少。Western Blot实验显示对比单药，两药联合明显下调了p-EGFR、BRAF、p-ERK的表达。结果显示，BRAF抑制剂维罗非尼无论在BRAF突变型还是野生型结直肠癌细胞株中，均能增强西妥昔单抗作用的敏感性。

西妥昔单抗；维罗非尼；EGFR;BRAF;结直肠癌

结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)是世界范围内最常见的消化系统恶性肿瘤之一，统计显示，目前结直肠癌的发病率和死亡率均居各种常见恶性肿瘤前列。研究表明，CRC在发生、发展过程中与多条信号转导通路的活化密切相关，其中表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)介导的通路尤为重要。EGFR是一种跨膜酪氨酸激酶受体，广泛分布于人体各种组织器官的细胞中。……