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感染HCMV的U251干细胞裸鼠大脑移植瘤模型的建立

2017-06-01高景云吕婷婷钱冬萌

微生物学杂志 2017年2期
关键词:生长血清检测

高景云, 吕婷婷, 钱冬萌, 胡 明, 王 斌,*

(1.青岛大学医学部 病原生物学教研室,山东 青岛 266071;2.青岛大学医学部 公共卫生学院,山东 青岛 266071)

感染HCMV的U251干细胞裸鼠大脑移植瘤模型的建立

高景云1, 吕婷婷1, 钱冬萌2, 胡 明2, 王 斌1,2*

(1.青岛大学医学部 病原生物学教研室,山东 青岛 266071;2.青岛大学医学部 公共卫生学院,山东 青岛 266071)

研究人巨细胞病毒(HCMV)感染的U251干细胞(GSCS)裸鼠颅内成瘤情况。用单克隆培养法从U251细胞系中分离出GSCS,采用流式细胞仪检测分离出的GSCS中CD133的表达,感染HCMV病毒,制备细胞密度为1×107个/mL的GSCS悬液。取20 只SPF级BALB/c裸鼠腹部麻醉,固定在立体定位仪上,在裸鼠颅脑钻一小孔,将 3 μL干细胞悬液缓慢接种于裸鼠颅内,随机分为HCMV感染组和未感染HCMV组。观察HCMV对肿瘤生长及裸鼠存活情况,处死濒死裸鼠取脑组织做免疫组化检测HCMV感染组胶质瘤内IE蛋白是否持续表达及HCMV感染对胶质瘤干细胞分化为血管的影响。结果显示,经单克隆法分选出的GSCS在无血清培养基中成球生长;经流式细胞仪检测,分离出的GSCS中CD133比例为98.00%;裸鼠脑内出现膨胀性生长的肿瘤;HCMV感染组肿瘤组织中检测到IE高表达,HCMV感染可促进CD133阳性胶质瘤干细胞分化为CD34阳性血管内皮细胞。以上结果表明,HCMV的IE蛋白能在通过此方法建立的HCMV阳性移植瘤中持续表达,且HCMV能促进GSCS分化为血管内皮细胞。

胶质瘤;肿瘤干细胞;裸鼠;HCMV感染

人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV) 是双链DNA病毒,属于疱疹病毒β亚科,成年人感染率高达70%~100%[1],能引起新生儿缺陷及先天性畸形[2]。近十几年来,许多报道在多种肿瘤组织中检测到HCMV基因的表达,其中恶性神经胶质瘤组织中HCMV感染率约90%[3]。……

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