柴姣

摘 要：目的：探讨Rb和PCNA基因在宫颈癌发生中的作用。方法：应用免疫组织化学S-P法检测Rb和PCNA基因在20例早期宫颈癌和20例正常黏膜中的表达。结果：Rb在早期癌中的表达低于正常黏膜（P<0.05），PCNA在早期癌中的表达高于正常黏膜（P<0.05）。结论：Rb和PCNA与宫颈癌的发生有关，他们的变化是宫颈癌发生中的早期事件。

关键词：Rb；PCNA；早期宫颈癌；免疫组织化学

中图分类号：R737 文献标识码：A 文章编号：1671-2064（2017）05-0194-01

宫颈癌是一种很常见的妇科恶性肿瘤，在我国居于妇科恶性肿瘤的第一位。宫颈癌早期症状一般不明显，大部分患者发现症状去就诊时已处于中晚期，治疗效果很差。如果能做到宫颈癌的早期诊断，经过以手术为主的综合治疗，早期宫颈癌患者的5年生存率可达90%以上。所以，提高早期宫颈癌诊断率非常有助于提高宫颈癌的治疗效果。

我们拟通过对早期宫颈癌组织中Rb和PCNA表达的检测，探讨二者在宫颈癌发生中的作用及其相互关系。

1 材料与方法

1.1 材料

20例早期宫颈癌和20例正常宫颈黏膜标本均为安阳市第三人民医院手术标本。组织学类型：早期癌均为鳞癌。所有标本经10%甲醛固定，石蜡包埋切片；抗体及免疫组化试剂盒均购自北京中杉公司。

1.2 方法

免疫组织化学S-P法：切片常规脱蜡水化，高压抗原热修复，其余步骤按试剂说明书上进行。Rb和PCNA的抗体稀释度为均为1：100，用已知阳性切片作为阳性对照，用PBS代替一抗做阴性对照。

1.3 结果判定

细胞核内见均匀一致的棕黄色颗粒为阳性，根据阳性细胞的数量进行结果判定：阳性细胞数低于5%为阴性（-），阳性细胞数大于等于5%为阳性（+）。

1.4 统计学处理

采用Fishers精确概率检验，以α=0.05作为检验水准。

2 结果

Rb在早期癌和正常黏膜中的阳性率分别为65%（13/20）和100%（20/20），Rb在早期癌中与正常黏膜相比表达降低（P<0.05），见表1；PCNA在早期癌和正常黏膜中的阳性率分别为85%（11/20）和20%（20/20），PCNA在早期癌中与正常黏膜相比表达增高（P<0.05），见表2。经Spearman等级相关检验，Rb和PCNA的表达存在负相关关系。

3 讨论

Rb基因（视网膜母细胞瘤易感基因）长约180kb，基因定位于13q14.2-q14.3，它在人类所有组织中均广泛表达，编码的蛋白产物为110kD的核磷酸蛋白，其蛋白产物能抑制细胞生长，因此缺乏这种正常的活性产物，将导致细胞增殖失控。Rb基因是第一个被广泛研究和确定的抑癌基因，人体许多肿瘤，包括食管癌[1]，肺癌[2]，肝癌等，都已發现Rb基因的点突变，重排和丢失的改变，Rb基因的表达降低。增殖细胞核抗原，简称PCNA，由Miyachi等于1978年首次发现并命名。肿瘤细胞具有旺盛的增殖活性，而PCNA可作为评价细胞增殖状态的指标。因此，国内外在许多肿瘤中进行了PCNA的研究，发现PCNA在很多肿瘤中存在表达增高的情况，比如食管癌，肺癌，乳腺癌等。

本实验结果显示，Rb在早期癌中与正常黏膜相比呈表达降低（P<0.05）， PCNA在早期癌中与正常黏膜相比表达增高（P<0.05）。这些提示Rb和PCNA的异常在宫颈癌的早期发生中可能起重要作用，是宫颈癌发生中的早期事件。两者的表达呈负相关关系，提示Rb的表达降低和PCNA的表达增高可能共同参与了宫颈癌的发生。两者在宫颈癌中具体的作用机制，还有待于进一步深入研究。

参考文献

[1]Characterization of tumor suppressive function of cornulin in esophageal squamous cell carcinoma.Chen K， Li Y， Dai Y，et al.PLoS One. 2013 Jul 24；8（7）：e68838.

[2]Expression of the lncRNA Maternally Expressed Gene 3 （MEG3） Contributes to the Control of Lung CancerCell Proliferation by the Rb Pathway.Kruer TL， Dougherty SM， Reynolds L， et al.PLoS One. 2016 Nov 10；11（11）：e0166363.