胡明豪 王彬 付雷 徐建 陆宇



体外诱导获取对利奈唑胺耐药的结核分枝杆菌菌株及其稳定性研究

胡明豪 王彬 付雷 徐建 陆宇

目的 利用浓度2倍递增的方法体外诱导获得对利奈唑胺(linezolid，Lzd)耐药的结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis，MTB)菌株，考察其耐药稳定性及用于筛选新化合物的抗结核活性。方法 将MTB标准株H37Rv(ATCC27294)在Lzd浓度2倍递增的含药固体培养基上进行传代培养，逐步诱导菌株对Lzd耐药，运用微孔板阿尔玛蓝(microplate alamar blue assay，MABA)法测定部分抗结核药物对体外诱导Lzd耐药株的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration，MIC)，对体外诱导获得的Lzd耐药株测序鉴定rplC基因的突变情况。将诱导Lzd耐药菌株在无药固体培养基上连续传代培养10代以观察耐药稳定性变化，包括MIC变化和rplC基因突变情况。结果 MTB标准株诱导后得到7株单克隆MTB菌株，其对Lzd的MIC值范围是5.99～18.28 μg/ml，为诱导前(0.25 μg/ml)8倍以上，成功获得Lzd耐药株，且对Sutezolid(PNU-100480)同时发生交叉耐药，7株菌株均检测到rplC基因中T460C的突变。体外诱导Lzd耐药株在无药固体培养基上连续传代10代，MIC值有所下降(范围为4.71～7.47 μg/ml)，但均稳定在诱导前8倍以上。结论 通过体外诱导实验可以获得对2种恶唑烷酮类(Oxazolidinones)药物均耐药的MTB耐药菌株；rplC基因突变与MTB对恶唑烷酮类药物的耐药相关；MTB对恶唑烷酮类药物的耐药稳定性较强，较难复敏。

分枝杆菌，结核； 恶唑烷酮类； 体外研究； 抗药性，细菌； 连续传代

利奈唑胺(linezolid，Lzd)属于第五组抗结核药物[1]，具有良好的抗结核活性，且独特的作用机制使得它与传统抗结核药无交叉耐药性。已有研究提示，Lzd治疗耐多药结核病(multidrug-resistant tuberculosis，MDR-TB)和广泛耐药结核病(extensively drug resistant tuberculosis，XDR-TB)取得了比较好的临床效果；……