王正想,冯世军,张广静,张国强 ,刘思源

1．河北省沧州市中心医院皮肤科(沧州061001)，2.河北医科大学第四医院皮肤科(石家庄050010)， 3.河北医科大学第三医院骨与软组织肿瘤科(石家庄050010)

·基础研究·

RNA干扰CXCR4基因对人恶性黑素瘤A375增殖和凋亡的影响*

王正想1,冯世军1,张广静1,张国强2,刘思源3△

1．河北省沧州市中心医院皮肤科(沧州061001)，2.河北医科大学第四医院皮肤科(石家庄050010)， 3.河北医科大学第三医院骨与软组织肿瘤科(石家庄050010)

目的：观察CXCR4基因沉默后人恶性黑素瘤A375细胞增殖及侵袭能力变化。方法：体外培养人恶性黑素瘤A375细胞，分为A、B、C 3组，分别为siRNA组，转染空病毒载体的阴性对照组，细胞不做任何处理的空白对照组。转染后1、3、5、7 d在倒置相差显微镜观察A375细胞分化及形态，MTT比色分析法检测对A375细胞增殖抑制的影响，采用流式细胞分析术，Anexin-ⅴ-PI双染色检测细胞早期凋亡的变化。转染后7d采用RT-PCR检测CXCR4 siRNA表达情况。结果：转染后C组细胞出现不同程度的皱缩、破裂，漂浮细胞增多。转染后1、3、5、7 d，A组OD值低于B、C组(P<0.05)，A组早期凋亡率的变化与B、C组有统计学差异(P<0.05)。RT-PCR半定量分析结果显示，A、B、C组CXCR4基因 mRNA校正值分别为(0.149±0.043)，(0.215±0.030)，(0.221±0.020)，A 组与B、C组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论：CXCR4基因沉默后A375细胞增殖被抑制，早期凋亡增加，CXCR4基因成为恶性黑素瘤治疗的新靶点。

恶性黑色素瘤(Malignant melanoma,MM)是起源于神经嵴的黑素细胞恶性肿瘤，发病率占皮肤恶性肿瘤的第三位[1-2](6.8%～20%)，是皮肤科领域最常引起死亡的恶性肿瘤,其病死率占全部皮肤肿瘤的65%[3]，且发病人数逐渐增多[4]，恶性黑色素瘤的恶性程度高﹑发生转移早,对放/化疗均不敏感 ，目前转移性黑素瘤的预后差，平均生存时间为6～9个月。近年来，认识到MM是一种异质性疾病，其形成与一些信号转导途径的异常相关，其中主要包括CKIT途径、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径、P13K-AKT等途径中的多个基因，MM的分子靶向治疗成为国内外研究的热点。……