金莲锦，李云矗，李罡，徐春燕，孙平

(1牡丹江医学院附属红旗医院，黑龙江牡丹江157011；2牡丹江医学院；3牡丹江肿瘤医院)

人乳腺癌组织和细胞中TNFR1表达及其对MCF-7细胞增殖、凋亡的影响

金莲锦1，李云矗2，李罡1，徐春燕3，孙平2

(1牡丹江医学院附属红旗医院，黑龙江牡丹江157011；2牡丹江医学院；3牡丹江肿瘤医院)

目的 观察人乳腺癌组织和细胞中肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)的表达，以及抑制人乳腺癌细胞MCF-7中TNFR1表达对细胞增殖及凋亡的影响，并探讨相关机制。方法 取新鲜乳腺癌组织及癌旁组织各30例、人乳腺癌细胞株(MCF-7、MDA-MB-231、T47D)和人正常乳腺细胞，采用Real-time PCR法检测组织和细胞中的TNFR1 mRNA；将MCF-7细胞分为3组，A组不转染，B组转染阴性对照质粒，C组转染siRNA-TNFR1质粒，转染72 h后分别采用MTT法及流式细胞仪观察细胞增殖及凋亡，Western blot法检测细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶8(Caspase-8)及核转录因子κB(NF-κB)。结果 人乳腺癌组织和癌旁组织中TNFR1 mRNA相对表达量分别为1.41±0.08和0.38±0.05，癌组织与癌旁组织相比P<0.05；人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、T47D中TNFR1 mRNA相对表达量分别为2.48±0.06、1.51±0.02、1.66±0.01，人正常乳腺细胞中TNFR1 mRNA相对表达量为1.00±0.09，人乳腺癌细胞与人正常乳腺细胞相比P均<0.05。A、B、C组细胞增殖能力(吸光度值)分别为0.96±0.09、0.93±0.11、0.62±0.05，细胞凋亡率分别为8.23%±3.50%、9.92%±3.19%、24.61%±2.46%，C组与A、B组比较P均<0.05。A、B、C组细胞中Caspase-8蛋白相对表达量分别为0.40±0.03、0.42±0.05、0.82±0.01，NF-κB蛋白表达相对量分别为0.79±0.03、0.76±0.04、0.32±0.06，C组与A、B组比较P均<0.05。结论 人乳腺癌组织和细胞中TNFR基因高表达，其可能通过激活NF-κB信号通路抑制Caspase-8的表达来促进乳腺癌细胞增殖、抑制细胞亡。

乳腺癌；MCF-7细胞;肿瘤坏死因子受体1;半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶8；核转录因子κB

据2012年全球范围统计，每年大约有167万女性被确诊为乳腺癌患者，死亡人数接近52万[1]。目前乳腺癌的发病机制仍不清楚，因此研究乳腺癌的发病机制，寻找新的诊断和治疗靶点迫在眉睫。研究表明，癌症的发生和发展与慢性炎症形成的微环境有关。微环境中大量的炎症因子在肿瘤的发生和发展过程中起到重要的调节作用[2～4]。肿瘤坏死因子α(TNF-α)是肿瘤微环境中的重要一员，主要通过与两个TNF-α受体(TNFR1和TNFR2)结合发挥生物学作用，而TNFR1是介导TNF-α发挥生物学功能的主要受体[5～7]。……