刘唤明,张芷欣,洪鹏志,*,周春霞,杨 萍,陈康健,吴金红

(1.广东海洋大学食品科技学院,广东省水产品加工与安全重点实验室,水产品深加工广东普通高校重点实验室,广东湛江 524088；2.广东省水产品深加工及副产物高值化利用工程技术研究中心,湛江恒兴水产科技有限公司,广东湛江 510300)

耐高温蛋白酶产生菌的筛选及酶学特性的初步研究

刘唤明1,张芷欣1,洪鹏志1,*,周春霞1,杨 萍1,陈康健2,吴金红2

(1.广东海洋大学食品科技学院,广东省水产品加工与安全重点实验室,水产品深加工广东普通高校重点实验室,广东湛江 524088；2.广东省水产品深加工及副产物高值化利用工程技术研究中心,湛江恒兴水产科技有限公司,广东湛江 510300)

为了提供可用于水产饲料添加剂用途的蛋白酶,从玛珥湖环境中筛选出耐高温蛋白酶产生菌株。通过牛奶平板筛选的方法从土壤中分离获得30株产蛋白酶菌株,并通过摇瓶发酵复筛的方法筛选产酶最高的菌株HL-3,其发酵液的蛋白酶活性高达399.2 U/mL。通过生理生化特征鉴定、16S rDNA基因序列和系统发育分析,初步鉴定菌株HL-3为地衣芽孢杆菌。菌株HL-3所产蛋白酶的最适作用温度为70 ℃,最适pH为7.0,在90 ℃保温10 min 后酶活力仍可保留75.12%。在离子浓度为 1.0×10-3mol/L 时,Cu2+和Mn2+对该酶有较强的抑制作用,Fe2+、Zn2+、Ca2+对该酶有激活作用,Mg2+和K+对该酶活性几乎没有影响。预期该菌株产的蛋白酶具有用于水产饲料添加剂的潜力。

耐高温蛋白酶,地衣芽孢杆菌,玛珥湖

酶制剂可降解饲料中的抗营养因子,提高营养物质的消化利用率,对于高效环保饲料的研制生产具有积极的指导意义。……