曹国强张峰陈雷鸣陈海李彪冯晓文李红春谢海洋周琳

·论著·

不同时间下超低温保存肝癌组织细胞RNA完整性的差异分析

曹国强1张峰1陈雷鸣1陈海1李彪1冯晓文1李红春2谢海洋1周琳1

目的 研究肝癌组织细胞样本于-80℃超低温保存条件下的质量控制，探讨肝癌组织细胞样本在超低温保存中的时效性。方法 随机抽取超低温新鲜冻存（24 h内）、保存3个月、6个月和1年不同时长的肝癌和对应的癌旁组织细胞各12对，HE染色评估标本取材的准确性，采用Promega自动提取核酸仪提取肝脏细胞RNA，利用Agilent 2100生物分析仪进行RIN值及28S/18S比值分析。对新鲜冻存、保存3个月、6个月以及1年的组织细胞样本的RIN值和28S/18S比值进行组间非配对t检验。结果 HE染色镜下观察发现切片组织细胞中肿瘤细胞比例达到80﹪以上，为生物样本库的合格样本。生物分析仪检测结果显示超低温新鲜冻存、保存3个月、6个月和1年的癌和癌旁组织细胞的RIN均值均>7.0，平均28S/18S比值均>1.5，组间非配对t检验显示，保存1年的肝癌组织细胞相比于新鲜冻存（7.442±0.674 vs 8.617±0.769，P = 0.001）、保存3个月（7.442±0.674 vs 8.275±0.617，P = 0.005）和6个月（7.442±0.674 vs 8.175±0.970，P = 0.043）的组织细胞RIN值显著下降，提示存在一定程度的RNA降解，而其余各组之间差异均无统计学意义（P均> 0.05）。 结论 在超低温条件下新鲜冻存、保存3个月、6个月的肝癌及癌旁组织细胞，其质量均可以获得有效保证，而保存1年的肝癌组织细胞的RNA虽然存在一定程度的降解，但能够满足后续临床科研的要求。

肝肿瘤； 组织细胞； RNA； 低温保存

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