黄团结宋及时马珊珊程康邢衢李鹏刘腾飞杨波关方霞,

·论著·

重组人MG53蛋白对人脐带间充质干细胞氧化损伤的保护作用

黄团结1宋及时1马珊珊1程康1邢衢1李鹏1刘腾飞1杨波2关方霞1,2

目的 建立人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）的H2O2氧化损伤模型，探讨重组人MG53蛋白（rhMG53）对hUC-MSCs氧化损伤的保护作用。方法 使用组织块培养法从健康人脐带沃顿胶组织中分离培养hUC-MSCs，流式细胞仪检测细胞表型；CCK-8法检测hUC-MSCs的增殖和H2O2损伤程度。实验分为正常对照组（NC组）、rhMG53组、H2O2组和H2O2+rhMG53组。分别采用CCK-8法、Transwell小室、流式细胞术和β-半乳糖苷酶染色检测rhMG53蛋白对hUC-MSCs增殖、迁移、周期凋亡和衰老的影响。各组、各个时间点的吸光值采用析因设计的方差分析，组间比较采用单因素方差分析。结果 hUC-MSCs贴壁呈梭型生长，高表达间充质干细胞标志CD44、CD133、HLA-ABC，低表达CD34、CD45；H2O2对hUC-MSCs具有浓度和时间依赖性的损伤作用，确定200 μmol/L的H2O2处理16 h为hUC-MSCs氧化损伤的最适条件。与NC组相比，H2O2组细胞增殖（0.994±0.011 vs 1.331±0.014）、迁移率（8.15﹪±2.47﹪ vs 33.34﹪±3.62﹪）和S期细胞比例（29.67﹪±3.69﹪ vs 34.33﹪±4.25﹪）显著降低，细胞衰老（44.07﹪±5.26﹪ vs 5.7﹪±1.42﹪）和凋亡比例（52.63﹪±5.76﹪ vs 4.65﹪±1.23﹪）显著增加，差异具有统计学意义（均P < 0.05）；rhMG53组细胞增殖（1.509±0.086 vs 1.331±0.014）和迁移率（52.13﹪±5.46﹪ vs 33.34﹪±3.62﹪）显著提高，S期比例（35.27﹪±4.79﹪ vs 34.33﹪±4.25﹪）变化差异无统计学意义（P > 0.05），细胞衰老（3.92﹪±1.31﹪vs 5.7﹪±1.42﹪）和凋亡比例（3.96﹪±1.06﹪ vs 4.65﹪±1.23﹪）显著降低，差异具有统计学意义（均P < 0.05）。与H2O2组相比，H2O2+ rhMG53组细胞增殖（1.252±0.056 vs 0.994±0.011）、迁移率（18.93﹪±3.12﹪ vs 8.15﹪±2.47﹪）和S期比例（34.84﹪±3.45﹪ vs 29.67﹪±3.69﹪）显著提高，细胞衰老（17.89﹪±2.64﹪ vs 44.07﹪±5.26﹪）和凋亡比例（4.65﹪±1.23﹪ vs 17.63﹪±2.56﹪）显著降低，差异具有统计学意义（均P < 0.05）。结论 rhMG53对H2O2造成的hUC-MSCs氧化损伤有保护作用。

磷蛋白类； 脐带； 间质干细胞； 创伤和损伤； 保护

干细胞具有自我更新和多向分化潜能，在多种疾病的治疗中显示了广阔的应用前景，受到了广泛的关注[1-3]。人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUC-MSCs）具有来源丰富、取材方便、免疫原性低、无伦理争议等优点，是成体干细胞的理想来源，现已在神经系统疾病、免疫系统疾病和多种组织损伤的治疗等方面进行了深入的研究[4-8]。……