罗标+梁结玲+江跃武+陈健发+温成波

摘 要 目的：探讨超敏C反应蛋白（hs-CRP）联合中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）检测在小儿支原体肺炎中的诊断意义。方法：选取支原体肺炎患儿60例作为观察组，同期选取体检中心健康儿童30例作为对照组，采用免疫荧光法检测hs-CRP、改良快速偶氮偶联法检测NAP、ROC曲线分析上述指标诊断小儿支原体肺炎的效能。结果：观察组患儿急性期和恢复期血清hs-CRP、NAP水平明显高于对照组，且急性期患儿上述指标水平明显高于恢复期（P<0.05）。在诊断支原体肺炎效能方面，NAP

关键词 超敏C反应蛋白 中性粒细胞碱性磷酸酶 小儿支原体肺炎 诊断

中图分类号：R725.1 文献标识码：B 文章编号：1006-1533（2017）03-0044-03

Value of the determination of high sensitivity C-reactive protein and neutrophil alkaline phosphatase in diagnosis of children with mycoplasma pneumonia

LUO Biao1*， LIANG Jieling1， JIANG Yuewu2， CHEN Jianfa1， WEN Chengbo1

（1. Clinical Laboratory， Chashan Hospital， Dongguan City， Dongguan 523380， China； 2. Department of Pediatrics， Chashan Hospital， Dongguan City， Dongguan 523380， China）

ABSTRACT Objective： To discuss the value of the determination of high sensitivity C-reactive protein （hs-CRP） and neutrophil alkaline phosphatase （NAP） in diagnosis of children with mycoplasma pneumonia. Methods： Sixty cases of children with mycoplasma pneumonia were selected as an observation group and meanwhile 30 healthy children as a control group. NAP and hs-CRP were determined by a modified fast azo coupling method and an immunofluorescence method， respectively. The efficiency of above indexes in diagnosis of mycoplasma pneumonia was analyzed by ROC curve. Results： The levels of serum hsCRP and NAP were significantly higher in the observation group than in the control group， and the above indexes were higher in acute stage than in recovery period （P<0.05）. The diagnostic efficiency was as follows： NAP

KEy WORDS hs-CRP； NAP； children mycoplasma pneumonia； diagnosis

小儿支原体肺炎是臨床上常见的一种呼吸系统疾病，由支原体侵袭肺部引起炎性病变所致，可导致发热、厌食、持续剧烈咳嗽、畏寒、头痛等症状，严重影响患儿的身体健康和发育[1]。目前，小儿支原体肺炎的治疗关键在于及早发现、及早干预，其常见的检查方法有病原体培养等，但由于时间长、操作复杂等，对小儿支原体肺炎的早期鉴别诊断存在局限性，故如何快速、准确地诊断该疾病具有重要的临床意义[2]。对此，本研究通过联合检测血清超敏C反应蛋白（hypersensitive C-reactive protein，hs-CRP）、中性粒细胞碱性磷酸酶（neutrophil alkaline phosphatase，NAP）水平，探讨其对小儿支原体肺炎早期鉴别诊断的效能，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

1.1.1 临床资料

选取2013年6月—2015年12月期间我院確诊治疗的支原体肺炎患儿60例作为观察组，男42例，女18例，年龄1～12岁，平均年龄（5.79±2.17）岁，病程3～10 d，平均病程（4.21±1.26）d，同期选取体检中心健康儿童30例作为对照组，男20例，女10例，年龄1～13岁，平均年龄（5.88±2.24）岁，本次研究已经我院伦理委员会审批且通过，两组患者在性别、年龄等资料上比较无显著差异（P>0.05），一般资料具有可比性。

1.1.2 纳入和排除标准

纳入标准：①观察组患儿经临床症状、病史、血常规、经喉头负压吸痰病原体培养、CT或超声检查等证实为支原体肺炎[3]；②年龄在0～16岁范围内；③患者或其家属签署知情同意书。

排除标准：①伴有心、肝、肾等重要器官严重性疾病；②肺炎支原体IgM抗体检测呈阴性；③有血液系统严重性疾病；④拒绝或中途退出参与本次研究者。

2 方法

所有研究对象入院后均进行常规血或痰培养、支原体IgM抗体等检测（检测试剂盒由西安联尔公司提供）等基本检查，同时给予早晨空腹处理，抽取左上臂静脉血2 ml置入无菌EDTA抗凝试管中，将血液样本平均分为2份，1份通过韩国i-CHROMATM Reader型定量免疫分析仪及其配套试剂盒采用通过免疫荧光法进行hsCRP检测，试剂盒由杭州中翰盛泰医疗器械有限公司提供；1份采用改良快速偶氮偶联法检测NAP，即常规推制血片，新鲜血片固定用新鲜配制的95%乙醇固定10 min，蒸馏水冲洗待干后，用底物液（3% β甘油磷酸钠5 ml，2%巴比妥钠5 ml，蒸馏水10 ml，2% CaCl2 10 ml，2% MgSO4 1 ml）37 ℃下作用30 min，蒸馏水流水冲洗待干，用苏木素复染1～2 min，蒸馏水冲洗待干后显微镜油镜镜检，试剂盒由珠海贝索生物技术有限公司提供，上述操作均严格依据说明书相关规定进行。

2.1 指标观察[4]

统计分析所有研究对象血清hs-CRP、NAP水平及二者诊断效能情况，其中hs-CRP>10 mg/L者为阳性，其余为阴性，NAP水平根据胞质内红色沉淀物进行评估，即镜检细胞胞质呈现紫黑色或棕红色颗粒为阳性细胞，并计算100个中性粒细胞内阳性反应细胞数，占比（阳性细胞数/100×100%）>40%视为阳性。

2.2 统计学数据处理

采用SPSS 20.0统计软件处理数据，对计数资料比较采用χ2检验，对计量资料采用t检验，采用ROC曲线分析血清hs-CRP、NAP诊断小儿支原体肺炎的效能，在P<0.05时，差异有统计学意义。

3 结果

3.1 所有研究对象血清hs-CRP、NAP水平比较

观察组患儿急性期和恢复期血清hs-CRP、NAP水平明显高于对照组，且急性期患儿上述指标水平明显高于恢复期，有显著性差异（P<0.05，表1）。

3.2 不同方法诊断支原体肺炎的ROC曲线分析

ROC曲线结果显示，hs-CRP诊断小儿支原体肺炎的敏感性、特异性、准确性分别为96.55%、87.50%、93.33%，NAP诊断的敏感性、特异性、准确性分别为96.08%、71.79%、83.33%，二者联合诊断的敏感性、特异性、准确性分别为96.72%、96.55%、96.67%（图1）。

3.3 不同方法诊断支原体肺炎的敏感性、特异性、准确性比较

在诊断支原体肺炎的敏感性、准确性方面，NAP

4 讨论

小儿支原体肺炎是儿童最常见的感染性疾病之一，占儿童社区获得性肺炎的10%～40%，随病情进展可可发生灶性肺不张、肺实变和肺气肿，其治疗关键在于及早发现，及早干预[5-6]。近年来，随着人们生活、饮食等及环境发生变化，小儿支原体肺炎的发病呈现出逐渐增加的趋势，其鉴别诊断也逐渐受到人们的关注，但传统实验室培养检查由于检查时间长（约3～5 d）或操作复杂等，不利于该疾病的早期诊断，故寻找一种快捷且高准确性的诊断方法对指导患儿的临床治疗具有重要的价值[7]。

小儿支原体肺炎是由支原体在黏膜表面与呼吸道黏膜上皮细胞膜上神经氨酸受体紧密结合并附着其上，吸取自身所需要的营养，释放过氧化氢等有害物质造成黏膜上皮及纤毛细胞的破坏所致，且其释放的有害物质可能会激活机体内的中性粒细胞，随着大量的中性粒细胞被激活，可经释放具细胞毒性的氧自由基及蛋白酶而损伤肺组织，同时引起机体的炎症反应，促使机体合成和分泌大量的炎症因子，进一步损伤肺组织[8-9]。此外，支原体与呼吸道黏膜上皮细胞膜上的神经氨酸受体紧密结合后还可逃避黏膜纤毛的清除作用及吞噬细胞的吞噬作用，使其可持续性对肺组织造成损伤，最终导致肺炎的发生[10-12]。有研究显示，hs-CRP是一种常见的非特异性炎症标志物，由临床实验室采用超敏感检测技术进行检测，其水平变化可有效反映机体的炎症状态，在心肌梗死、组织损伤、及各种感染等情况下，可急剧上升，已被广泛应用于多种炎症或感染性疾病的检查中[13-15]。而章希文等[16]研究表明，NAP是中性粒细胞的一种标志酶，主要存在于成熟中性粒细胞内，可反映成熟粒细胞的成熟程度和功能，而中性粒细胞是参与机体炎症反应的主要细胞之一，故NAP可作为机体炎症反应的一种重要标志物。

因此，我们认为在小儿支原体肺炎的发生发展过程中，于急性期可能由于支原体引起機体的炎症反应，进而使机体肝脏合成和分泌大量的hs-CRP，同时其激活体内大量的中性粒细胞，随着细胞的成熟，NAP的活性也逐渐增强，故可引起患儿血清hs-CRP、NAP水平急剧上升；而于恢复期可能由于支原体不断被灭杀、机体炎症病灶不断被修复，支原体不能大量激活中性粒细胞，使机体的炎症反应缓解，故使患儿血清hs-CRP、NAP水平逐渐下降，同时可能由于患儿尚未完全康复，上述指标水平仍高于正常儿童。而本研究通过联合检测血清hs-CRP、NAP水平，发现观察组患儿急性期和恢复期上述指标水平明显高于对照组，且急性期患儿上述指标水平明显高于恢复期，ROC曲线结果显示，在诊断支原体肺炎的效能方面，NAP

综上所述，血清hs-CRP、NAP水平变化与小儿支原体肺炎的发生发展有关，二者联合检测对早期诊断小儿支原体肺炎具有良好的敏感性、特异性、准确性，可作为一种有效诊断方法。

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