张如胜，孙边成，姚 栋，叶 文，陈静芳，黄 政，刘晓蕾，欧新华，陈发明

2014年长沙市活禽市场污水中H5N1亚型禽流感病毒HA、NA及NS基因进化分析

张如胜，孙边成，姚 栋，叶 文，陈静芳，黄 政，刘晓蕾，欧新华，陈发明

目的 分析2014年长沙市活禽市场污水中H5N1亚型禽流感病毒(Avian influenza virus，AIV)血凝素(Hemagglutinin, HA)、神经氨酸酶(Neuraminidase, NA)及非结构蛋白(Non-structural,NS)基因进化特征。方法 从2014年长沙市活禽市场采集501份环境标本，利用Real-time PCR方法进行A型、H5、H7和H9亚型流感病毒核酸检测，并对单一H5阳性标本进行核苷酸测序，病毒HA、NA和NS基因测序结果进行在线BLAST分析，利用Mega5和Bioedit软件构建核苷酸进化树和氨基酸(Amino acids，aa)比对。结果 从501份环境标本中检出A型H5亚型病毒阳性标本177份(检出率35.33%)，其中8份标本经核苷酸测序鉴定为H5N1亚型病毒，进化分析表明大部分H5N1病毒HA基因位于2.3.2分支内，聚集形成一个新亚分支，NA及NS基因位于2.3.2.1b亚分支。HA蛋白受体结合位点aa为QSG, 表现为禽流感病毒受体特征；NA蛋白未出现H275Y及N295S aa替换，对神经氨酸酶抑制剂敏感；HA、NA及NS蛋白关键分子位点表现为高致病性的分子特征。结论 2014年长沙市活禽市场污水中H5N1亚型禽流感病毒 HA、NA和NS基因表现为高致病性的分子特征，但不具有对人易感的受体特征，需要进一步监测。

活禽市场；环境；禽流感病毒；H5N1亚型；基因；进化

根据流感病毒血凝素(Hemagglutinin, HA)和神经氨酸酶(Neuraminidase, NA)抗原性的不同，A型流感病毒可分为18个HA亚型(H1-H18)和11个NA亚型(N1-N11)[1]。根据禽流感病毒(Avian influenza virus，AIV)对禽致病性的不同，可以分为低致病性禽流感(low pathogenic avian influenza,LPAI)和高致病性禽流感(high pathogenic avian influenza,HPAI)病毒[2]。在这些亚型中，仅仅只有引起禽类高死亡率的H5和H7亚型被认为是HPAI病毒[2]。……