李睿，安建平，由春香，王小非，郝玉金

（山东农业大学园艺科学与工程学院/作物生物学国家重点实验室/农业部黄淮地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室，山东泰安 271018）

苹果异三聚体G蛋白α亚基基因MdGPA1的克隆及功能鉴定

李睿，安建平，由春香，王小非，郝玉金

（山东农业大学园艺科学与工程学院/作物生物学国家重点实验室/农业部黄淮地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室，山东泰安 271018）

【目的】异三聚体G蛋白（Heterotrimeric G protein）作为植物生物体内重要的信号转导分子，在感受外界环境刺激、参与植物抗逆反应和跨膜信号转导等方面发挥着重要作用。克隆异三聚体G蛋白α亚基基因MdGPA1，并在烟草中过量表达MdGPA1，对其进行生物学功能鉴定和生理指标分析，为多年生木本植物响应环境因子信号转导过程中的分子机理研究提供参考。【方法】本研究以‘嘎拉’苹果（Malus × domestica ‘Royal Gala’）为研究试材，利用同源序列比对和PCR技术，克隆获得MdGPA1。使用MEGA5.0构建GPA1物种间系统进化树；利用qRT-PCR方法检测该基因在苹果受非生物胁迫诱导表达及组织特异性表达情况。构建MdGPA1植物过表达载体，通过农杆菌介导法转化烟草叶片，比较干旱胁迫条件下野生型和转基因株系的表型与生理指标，验证MdGPA1在植物干旱胁迫条件下的生物学功能。【结果】克隆得到苹果异三聚体G蛋白α亚基基因MdGPA1（基因序列号：MDP0000881842），该基因长为1 173 bp，编码390个氨基酸。进化树分析表明MdGPA1与白梨PbGPA1亲缘关系最近，同源性最高。基因表达分析显示MdGPA1主要在叶片中表达，在根系中的表达量次之，在茎和果实中的表达量较低。……