陈国福，吴丽君，张雪鹏，蔡 准，孟祥潮

(华北理工大学附属医院肿瘤外科，唐山 063000)

ADAM17-shRNA在缺氧条件下对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响*

陈国福，吴丽君，张雪鹏△，蔡 准，孟祥潮

(华北理工大学附属医院肿瘤外科，唐山 063000)

目的 研究在缺氧环境下靶向针对解聚素-金属蛋白酶17(ADAM17)的短发夹状RNA(shRNA)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响。方法 针对ADAM17设计4个特异性的ADAM17-shRNA，经电穿孔法转染MCF-7细胞。缺氧条件下培养细胞。试验分为：对照组(空白磷酸盐缓冲液)、无义序列组(转染无义序列ADAM17-shRNA)和shRNA转染组(转染ADAM17-shRNA，选择沉默ADAM17基因效率最高的shRNA用于后续试验)。分别采用实时荧光定量PCR、iCELLigence、流式细胞仪检测细胞ADAM17mRNA的表达水平、细胞增殖活性和细胞周期变化。结果 4个shRNA转染组对MCF-7细胞的ADAM17基因表达均有沉默作用，与对照组及无义序列组相比，差异具有统计学意义(P<0.05)，尤以shRNA1219抑制率最高(F=5.11,P<0.01)。shRNA转染组的细胞生长速度和增殖活性较对照组和无义序列组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。shRNA转染组的绝大多数细胞停留在G0/G1期(73.35±2.45)，与对照组(62.56±2.35)、无义序列组(62.68±1.20)相比较,差异有统计学意义(P<0.05)，细胞周期进展明显延缓。结论ADAM17-shRNA在缺氧条件下抑制乳腺癌细胞MCF-7的增殖。

RNA；聚合酶链反应；缺氧；解聚素-金属蛋白酶17；RNA干扰；增殖

当今乳腺癌发病率呈逐年上升趋势，成为威胁女性健康的重要恶性肿瘤。对乳腺癌的病因学及发病机制的研究成为热点。解聚素-金属蛋白酶17(ADAM17)是解聚素-金属蛋白酶家族的重要成员之一。具有解聚素和金属蛋白酶的活性。近年来ADAM17在乳腺癌中的作用也越来越被关注。课题组前期研究提示ADAM17在乳腺癌的发生、发展的整个进程中起到了极其重要的作用[1]。然而肿瘤组织在快速增长过程中，必然会造成局部组织缺氧，缺氧对肿瘤的生长、增殖、凋亡、转移和侵袭等发挥重要且复杂的作用。研究已证实缺氧是乳腺癌等实体肿瘤物理微环境的基本特征之一[2]。……