陆飞越+建华+仁其+婷婷+良平

结核病是由结核分枝杆菌（MTB）感染引起的慢性传染病，对疑似结核病人进行痰抗酸杆菌涂片染色镜检及分枝杆菌培养，直接找到病原菌，对诊断结核病具有重要意义。但上述两种方法也有其局限性：涂片镜检法总的敏感性为22%～80%[1]，并且无法在镜下区分与MTB形态、染色相同的非结核分枝杆菌（NTM），而NTM 与MTB一样严重威胁人类健康[2-3]。分枝杆菌培养法是临床诊断结核病的“金标准”，但该方法灵敏度也不够高，阳性率约为40%～60%[4]，并且该法检测周期长，从培养至菌种鉴定一般需要8周甚至更长，且对早期结核菌感染者、药物治疗后细胞壁缺损L型细菌难以检出。为此，找到一种适合基层医疗单位应用，并能快速、灵敏诊断结核病，有效区分MTB与NTM的实验室诊断方法，在临床上有重要应用价值。荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）是一种在聚合酶链反应（PCR）体系中引入荧光基团，利用荧光信号实时监测整个PCR扩增进程的方法，可对标本中起始DNA模板进行定量，提高检测灵敏度，同时省去了电泳步骤，减少污染机会，特异性更好。FQ-PCR结果以循环阈值（Ct值）表示， Ct值越小，说明起始模板核酸浓度越高。本研究试图应用FQ-PCR法检测痰标本中MTB，以为临床提供一种快速、灵敏、特异的结核病辅助诊断方法。

1 材料与方法

1.1标本来源

分批收集自2013年5月—2014年6月，在平湖市第一人民医院（结核病定点诊断医院）留取的经抗酸杆菌涂片染色镜检阳性，且同时开展了分枝杆菌培养的合格痰标本共计115份，冻存于-20℃冰箱供FQ-PCR法检测MTB使用。……