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川藏公路拉萨-林芝沿线藏猪沙门氏菌的流行病学与敏感药物筛选

2017-02-02晋美多吉马金英拉巴次仁

养猪 2017年5期
关键词:林芝沙门氏菌琼脂

晋美多吉,马金英,拉巴次仁

(1.西藏自治区拉萨市达孜县农牧局,西藏 拉萨 850100;2.西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所,拉萨 850009;3.西藏自治区畜牧总站,拉萨 850000)

川藏公路拉萨-林芝沿线藏猪沙门氏菌的流行病学与敏感药物筛选

晋美多吉1,马金英2,拉巴次仁3

(1.西藏自治区拉萨市达孜县农牧局,西藏 拉萨 850100;2.西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所,拉萨 850009;3.西藏自治区畜牧总站,拉萨 850000)

为了解拉萨-林芝公路沿线藏猪沙门氏菌的流行情况,通过常规的直肠棉拭子分离培养对沿线12个乡镇的1 200份藏猪直肠棉拭子进行了检测。结果发现拉萨-林芝公路沿线12个乡镇存在沙门氏菌感染的情况,经细菌分离培养和生化鉴定,从62份直肠棉拭子分离出沙门氏菌,藏猪沙门氏菌病呈零星分布。采用药敏纸片扩散法对62株藏猪沙门氏菌进行了敏感药物筛选发现,拉萨-林芝公路沿线12个乡镇的藏猪沙门氏菌对卡那霉素、环丙沙星、氟苯尼考、先锋霉素和庆大霉素5种药高度敏感,对诺氟沙星、左氟沙星、阿莫西林中度敏感,对青霉素耐药。

藏猪沙门氏菌;分离鉴定;敏感药物;拉萨-林芝公路沿线

沙门氏菌为肠杆菌科沙门氏菌属成员,是一类条件性细胞内寄生的革兰氏阴性肠杆菌,血清型众多,能致多种动物患沙门氏菌病,该菌是自然界分布极为广泛的病原菌,几乎可以从所有脊椎动物乃至昆虫体内分离得到[1-2]。鉴于川藏公路沿线的旅游人士较多和拉萨-林芝公路沿线是藏猪养殖较为密集区,了解拉萨-林芝公路沿线藏猪沙门氏菌的感染情况与敏感药物筛选,在兽医及人医领域均有重要的公共卫生意义[1]。笔者于2016年8月对拉萨-林芝公路沿线12个乡镇采集藏猪直肠棉拭子共计1 200份,分离出了猪沙门氏菌,在此基础上进一步做了菌株分离及敏感药物筛选,结果如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验菌株 拉萨-林芝公路沿线蔡公堂乡、章多乡、甲玛乡、工卡镇、扎西岗乡、日多乡、加兴乡、金达镇、巴河镇、百巴镇、更章门巴民族乡、八一镇为采样点,采集被检藏猪直肠棉拭子1 200头份,保存于1 mL营养肉汤的灭菌医用配离心管,车载冰箱4℃保存。标明样品采集时间、地点、编号。

采样原则:每个采样点分别采集1岁以上藏猪直肠棉拭子40头份、断奶仔藏猪60头份。

1.1.2 标准菌株 沙门氏菌[CMCC(B)50094] 标准菌株购于杭州百思生物技术有限公司。

1.1.3 细菌培养基及配制 菌志贺氏增菌肉汤购于广东环凯微生物科技有限公司。称取营养肉汤31.5 g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15 min,待冷至常温,备用。

麦康凯琼脂培养基购于广东环凯微生物科技有限公司。称取麦康凯琼脂粉末55 g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15 min。待培养基冷至50~55℃倾注灭菌平皿,待凝固后,备用。

SS琼脂培养基平板、水解酪蛋白琼脂(MH琼脂)培养基平板和三糖铁琼脂培养管均购于杭州百思生物技术有限公司。

LB营养琼脂培养基平板购于上海凡仪科技发展有限公司。

1.1.4 沙门氏菌API-20E生化鉴定试纸条 生化反应鉴定试纸条API-20E购于法国梅里埃生物技术有限公司,用于肠杆菌属细菌的快速生化鉴定。

1.2 方法

1.2.1 沙门氏菌的分离和初步鉴定 细菌分离采用国标规定的标准方法(GB 4789.4—1994)[3]。藏猪直肠棉拭子接种于选择性菌志贺氏增菌肉汤培养基中37℃于摇床上振摇过夜。取一接种环细菌富集样本接种于麦康凯琼脂37℃培养12 h。将无色透明或中间有黑色圆点的单菌落接种琼脂,取典型菌落接种于三糖铁(TSI)试管,37℃培养12 h,并进一步做生化鉴定、血清型鉴定及抗生素敏感性分析。

1.2.2 沙门氏菌的生化鉴定 取疑似沙门氏菌典型菌落接种生化鉴定管37℃培养18~24 h。根据参考文献[3]食品卫生微生物学检验有关沙门氏菌检验的标准进行结果判断。

1.2.3 沙门氏菌API-20E试纸条的生化鉴定 将少量疑似沙门氏菌典型菌接种于API-20E试验条,培养20 h左右,加入相应显色试剂后观察其颜色的变化,根据说明表判读反应,参照分析图索引和APLAB PLus软件得到鉴定结果。

1.3 敏感药物筛选试验

青霉素、庆大霉素、诺氟沙星、左氟沙星、阿莫西林、卡那霉素、环丙沙星、氟苯尼考、先锋霉素9种药,按照常规药敏纸片扩散法于MH琼脂培养基平板上操作,并根据抑菌圈直径(Ф)判定药物敏感性,Ф≥20 mm为高度敏感,15 mm≤Ф<20 mm为中度敏感,Ф<15 mm为耐药。

2 结果

2.1 分离菌株鉴定结果

从拉萨-林芝公路沿线蔡公堂乡、章多乡、甲玛乡、工卡镇、扎西岗乡、日多乡、加兴乡、金达镇、巴河镇、百巴镇、更章门巴民族乡、八一镇采集的藏猪直肠棉拭子1 200头份的样品中,共分离鉴定出62株沙门氏菌菌株。

2.2 敏感药物筛选试验

对分离出的62株沙门氏菌菌株敏感药物筛选试验结果发现,从拉萨-林芝公路沿线蔡公堂乡、章多乡、甲玛乡、工卡镇、扎西岗乡、日多乡、加兴乡、金达镇、巴河镇、百巴镇、更章门巴民族乡、八一镇不同乡镇分离获得的藏猪沙门氏菌致病菌株对卡那霉素、环丙沙星、氟苯尼考、先锋霉素和庆大霉素5种药高度敏感,对诺氟沙星、左氟沙星、阿莫西林中度敏感,对青霉素耐药。

3 讨论

沙门氏菌生化反应繁杂,血清型众多,用常规的检验程序复杂,且不容易给出正确的结果。鉴于科研条件有限,本研究未做血清型鉴定,只是在筛选鉴定出沙门氏菌的基础上针对青霉素、庆大霉素、诺氟沙星、左氟沙星、阿莫西林、卡那霉素、环丙沙星、氟苯尼考、先锋霉素9种药做了敏感药物筛选试验。

从拉萨-林芝公路沿线12个乡镇藏猪养殖较为密集区分离出的62株沙门氏菌对卡那霉素、环丙沙星、氟苯尼考、先锋霉素和庆大霉素5种药高度敏感,对诺氟沙星、左氟沙星、阿莫西林中度敏感,对青霉素耐药。说明拉萨-林芝公路沿线藏农牧民经常盲目给发病猪使用青霉素,致使沙门氏菌产生耐药。对发病藏猪,在确诊的基础上,有必要与相关教学科研单位协作,通过药敏试验,有目的、有针对性地用药,且用药应有足够疗程和剂量,尽量减少耐药菌株产生。不可盲目滥用、乱用抗生素[4]导致菌群失调引起藏猪腹泻,尤其是藏猪仔猪[5]。

藏猪沙门氏菌病是由沙门氏菌属细菌感染藏猪引起的一种传染病,发病藏猪和带菌藏猪是主要传染源,可从粪、尿、乳汁以及流产的胎儿、胎衣和羊水排菌。沙门氏菌很容易在动物与动物、动物与人、人与人之间通过直接或间接的途径传播,没有中间宿主。主要经消化道感染。一年四季均可发生,但阴雨潮湿季节多发[1]。

感染沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染食品,可使人发生食物中毒。人畜感染沙门氏菌后可呈无症状带菌,降低动物的繁殖力,或者可能加重病态或死亡率,也可表现为有临床症状的致死性疾病,造成巨大的经济损失。同时严重威胁人们的身体健康和畜牧业的健康发展。因而做好沙门氏菌病的防控工作在医学、兽医和公共卫生上都有十分重要的意义。

[1] 陈溥言.兽医传染病学[M] .第6版.北京:中国农业出版社,2016:117-125.

[2] 李决.兽医微生物及免疫学[M] .第2版.成都:四川科学技术出版社,2003:184-190.

[3] GB 4789.4—1994,食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验[S] .

[4] 陈洪生.动物疫病防控中存在的问题及应对措施[J] .畜牧与饲料科学,2015,36(1):111-112.

[5] 王艳敏,古金元,谢全喜,等.仔猪菌群失调引起腹泻的微生态防治方法[J] .畜牧与饲料科学,2015,36(2):114-119.

(编辑:郭玉翠)

中国居民收入差距不断缩小

国家统计局发布统计报告说,党的十八大以来,我国城乡居民收入持续较快增长,收入差距不断缩小。2016年,全国居民人均可支配收入基尼系数为0.465,比2012年的0.474下降0.009。

数据显示,十八大以来我国居民收入增速快于经济增速。2016年全国居民人均可支配收入23821元,比2012年增长44.3%,扣除价格因素,实际增长33.30%,年均实际增长7.4%,快于同期GDP年均增速0.2个百分点,更快于同期人均GDP年均增速0.8个百分点。

同时,城乡收入差距持续缩小。2016年,城镇居民人均可支配收入33 616元,比2012年增长39.3%,实际增长28.6%,年均实际增长6.5%;农村居民人均可支配收入12 363元,比2012年增长47.4%,实际增长36.3%,年均实际增长8.0%;城乡居民人均可支配收入之比为2.72(农村居民收入=1),比2012年下降0.16。

(摘自 人民日报海外版[J] ,2017-07-07)

S858.28

A

1002-1957(2017)05-0113-02

2017-06-13

晋美多吉(1983-),男,西藏日喀则人,初级兽医师,主要从事高原畜禽疫病防控技术服务指导工作.

E-mail:jinmeiduoji0891@126.com

马金英(1971-),女,西藏拉萨人,副研究员,硕士,主要从事高原动物安全生产研究工作.E-mail:majinying0891@163.com

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