林晨 温成平 范永升

·实验研究·

蕲蛇乙醇提取物多肽成分的蛋白组学研究

林晨 温成平 范永升

目的通过蛋白质组学方法分析蕲蛇乙醇提取物中的多肽类成分。方法双向凝胶电泳技术分离多肽，染色后切取多肽斑点胶内酶切，利用基质辅助激光解吸离子飞行时间串联质谱（MALDI-TOF-MS/MS）分析酶切后抽提的肽段，获取的质谱数据进一步用于数据库检索，鉴定相关肽段序列。结果采用稀乙醇热浸法每克蕲蛇药材多肽溶出率为5.48%。凝胶图像显示各等电点区间均有2kDa的多肽分布，无法通过串联质谱数据结合数据库检索方式有效鉴定，而在15kDa区间存在的胶点中高置信度匹配到多个肽段。结论采用稀乙醇热浸法能有效提取蕲蛇干燥药材中的多肽成分。

蕲蛇；多肽；蛋白质组学；凝胶电泳；质谱鉴定

中药蕲蛇为蝰科动物五步蛇Agkistrodon acutus（Guenther）的干燥体，具有祛风散寒，舒筋活络的功效，《景岳全书》称颂其“风毒恶疮，俱为要药”[1]。近年研究表明，蕲蛇含有核苷类[2]和磷脂类[3]成分，但对这些成分的生物活性并无相关报道。另一方面，蕲蛇属于动物药，以干燥蛇体入药，富含蛋白质，药材中总氨基酸含量接近70%[4]，但一直以来对这类成分的研究较少。刘训红等[5]早期研究从蕲蛇提取物中测得一类分子量未知的酸性蛋白，丁兴红等[2]通过生物酶解方法从蕲蛇中提取出130kDa的Ⅱ型胶原蛋白，具有炎症抑制活性[6-7]。最近，柴士伟等[8]以蕲蛇药材中四种氨基酸总含量为指标来优化汤剂的煎煮工艺。……