用酶联免疫吸附法对猪O型口蹄疫免疫抗体监测及分析

2016-12-19罗燕

四川农业科技 2016年11期

关键词：商品猪遂宁市免疫抗体

罗燕

(四川省遂宁市农业局，四川遂宁 629000)

用酶联免疫吸附法对猪O型口蹄疫免疫抗体监测及分析

罗燕

(四川省遂宁市农业局，四川遂宁 629000)

为切实了解、掌握遂宁市生猪口蹄疫免疫效果，以科学有效预防该病，2015年，随机抽取全市部分规模场、散养户以及屠宰场猪血清3100份，用酶联免疫吸附试验监测O型口蹄疫免疫抗体。结果表明，猪O型口蹄疫免疫抗体整体合格率为80.98%，其中抗体最好的是规模场，四个季度的免疫抗体合格率差异不大，各规模场商品猪在不同季度，猪O型口蹄疫免疫抗体群体合格率均达到80%以上，种猪多数场免疫抗体群体合格率达到了90%以上；散养户及屠宰场免疫抗体合格率分别为74.71%、71.96%。说明我市始终坚持“规模养殖场按程序进行免疫，散养畜禽实行春秋两季集中免疫、每月及时补免”的工作制度，坚持“应免尽免，不留空档”的工作标准，把口蹄疫等重大动物疫病免疫放在防疫工作的突出位置，成效显著。

酶联免疫吸附试验；O型口蹄疫；抗体监测

口蹄疫(Foot and mouth disease，FMD)俗称“口疮”，是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄兽急性发热性接触性传染病，对畜牧业生产和国际贸易造成巨大的经济损失，并严重影响到人民的生活和健康[1]。主要表现口腔粘膜、蹄部和乳房发生特征性水泡和溃疡,猪为易感动物。此病的危害极大，我国将其列为一类病种，是国家制定强制免疫对象之一。免疫预防是防控该疫病发生的有效措施，因此，加强猪口蹄疫免疫工作已成为养猪业日常工作的重点[2]。为此，遂宁市对猪口蹄疫全面推行强制免疫，口蹄疫应免数量免疫密度常年维持在100%，免疫抗体合格率全年应保持在70%以上。要求散养户春秋两季集中免疫与月月补针相结合。规模场常年按程序免疫，屠宰场加强屠宰管理、屠宰检疫，最终达到净化效果[3]。遂宁市要求猪为使免疫效果得到保障，2015年，遂宁市动物疫病预防控制中心随机抽取部分规模场、散养户以及屠宰场的生猪进行了猪O型口蹄疫的免疫抗体监测，旨在分析评估口蹄疫的疫情风险，完善各防疫措施。

1 材料与方法

1.1 疫苗与免疫程序

1.1.1 免疫疫苗猪O型口蹄疫灭活疫苗由政府统一采购自新疆天康畜牧生物技术股份有限公司，由区县兽医主管部门统一下发。

1.1.2 免疫程序规模养猪场采取仔猪28～35d首免，免疫剂量为肌注1mL/头，首免30d后加强免疫1次，免疫剂量为肌注2mL/头；种公猪和母猪每4个月接种1次，每次免疫剂量为肌注3mL/头；散养猪采用春秋两季集中免疫，定期补免措施，每次免疫剂量为2mL/头。

1.2 采样点选择

每季度随机选取市辖区规模养殖场15场(次)，屠宰场10场(次)，散养户30户(次)进行血液样品采集、分离血清。

1.3 采样要求

每季度，每个规模养殖场随机采集血样20份，每个散养户采集5～10份，每个屠宰场采集20份，并记录采集地点、猪场规模、免疫时间、免疫次数、疫苗品种、生产厂家、批号及猪群健康状况等资料，每份样品采血量大于1.5mL。

1.4 样品采集数量

全年共采集猪血清3100份，其中规模猪场商品猪血样1157份，规模猪场种猪血样412份，屠宰场血样723份，散养户血样808份。

1.5 诊断试剂与方法

猪口蹄疫抗体监测ELISA试剂：购自深圳市真瑞生物有限公司，诊断试剂在有效期内使用，批号为2015101377；试验严格按照诊断试剂说明书的要求进行操作[4]。

1.6 结果判定

以空白对照调零用酶标仪于450nm(630nm作参比波长)读取吸光度A值。PI(阻断率)>35%则判断为阳性；PI≤35%则判断为阴性。

2 试验结果

2.1 不同采集点抗体合格率

由表1可见，全年平均免疫抗体合格率，规模场商品猪合格率(85.15%)>散养户(74.71%)>屠宰场(71.96)；在规模场中，种猪合格率(92.08%)>商品猪(85.15%)。

表1 不同场点各季度猪O型口蹄疫免疫抗体合格率

图1 不同场点各季度猪O型口蹄疫免疫抗体合格率曲线图

2.2 四个季度抗体合格率状况

由表1、图1看出，对不同季度采集的猪血清进行O型口蹄疫免疫抗体监测发现，不同养殖类型的不同场点，群体免疫抗体合格率均高于农业部规定的70%的要求。规模场商品猪及种猪各自所在群体四个季度的免疫抗体合格率差异不大，并且抗体持续处于较高水平；散养户、屠宰场第二、四季度的抗体合格率均高于第一、三季度，其中散养户第三季度抗体水平处于最低，屠宰场相比规模场、散养户抗体水平较低，且第一季度抗体水平处于最低；由表2得出，规模场商品猪各养殖场在不同季度，猪O型口蹄疫免疫抗体群体合格率均达到80%以上，种猪多数场免疫抗体群体合格率达到了90%以上。

3 分析与讨论

(1)我市要求猪口蹄疫应免群体免疫密度常年维持在100%，从2015年监测的结果来看,在抽取的3100份猪血清的猪O型口蹄疫免疫抗体合格率达80.98%，超过了农业部规定的要求(70%)，说明我市始终坚持“规模养殖场按程序进行免疫，散养畜禽实行春秋两季集中免疫、每月及时补免”的工作制度，坚持“应免尽免，不留空档”的工作标准，把口蹄疫等重大动物疫病免疫放在防疫工作的突出位置，成效显著。

(2)全年监测数据来看规模场各季度猪O型口蹄疫免疫抗体群体合格率差异不大，一直处于较高水平；散养户由于第一季度处于屠宰或出栏高峰期，存栏数量、抽检数量均较少。第一季度在秋防结束后经过几个月，抗体水平逐渐降低，虽每月进行补免，但屠宰季节多数散养户不进行疫苗免疫，个别猪处于免疫空档期，致使免疫抗体水平合格率相对较低。第三季度处于春、秋防过渡临界期，抗体水平也相对处于较低水平。对部分散养户的调查了解，畜主担心猪接种口蹄疫疫苗后导致猪过敏反应，未按规定程序免疫猪口蹄疫疫苗[5]。调查发现，个别养殖者认为口蹄疫是寒冷季节发病率较高的疫病，所以仅注重第一、四季度的免疫预防，导致口蹄疫抗体合格率在不同季节的差异较大。但总的合格率仍高于农业部规定的70%的要求。

(3)由于国家拨付给村级防疫员的工资经费有限，加之免疫注射工作量大，有些村级动物防疫员只做春秋两季的集中免疫，平时的月月补针不能及时到位，存在应免未免、补栏不能及时补免等现象，也是导致第一季度、第三季度散养户猪O型口蹄疫免疫抗体水平较低的原因之一。