孔巧巧(综述)　邹志强(审校)

1 滨州医学院临床医学院　烟台　264003；2 烟台市传染病医院七科；3 烟台市传染病医院



热休克蛋白90α与原发性肝癌关系的研究进展

孔巧巧1，2(综述)邹志强3(审校)

1 滨州医学院临床医学院烟台264003；2 烟台市传染病医院七科；3 烟台市传染病医院

热休克蛋白90α；原发性肝癌；乙型肝炎病毒

原发性肝癌是目前世界上致死率最高的恶性肿瘤之一，在全世界范围内发病率有逐年上升的趋势。由于起病隐匿，早期无症状或临床症状不明显，进展迅速，确诊时已达局部晚期或发生转移，预后差。因此，肝癌的早期筛查和监测非常重要。热休克蛋白90α作为一种新的肿瘤标记物，已有研究表明，热休克蛋白90α在原发性肝癌中高表达[1]，与原发性肝癌的发生、发展、生物学行为及预后密切相关[2]。现结合文献，对热休克蛋白90α与原发性肝癌关系的研究进展综述如下。

1　热休克蛋白及其生物学行为

1.1热休克蛋白90α及其功能热休克蛋白90α(Hsp90α)是细胞中普遍存在的与应激损伤关系密切的蛋白质，具有分子伴侣作用，在正常和应激条件下有十分广泛的功能。通过调控多种癌症蛋白的功能，Hsp90α参与了肿瘤细胞的增殖、存活、侵入、转移以及其它重要的过程。研究表明，Hsp90α可促进细胞迁移并通过调节细胞周期促进细胞增殖。肿瘤细胞尤其依赖Hsp90α生存于氧含量低、营养缺乏的微环境[3]，Hsp90α参与低氧诱导因子的信号传导通路。Hsp90α可作为一种正向调节因子参与血管再生。细胞外的Hsp90α主要在神经细胞、真皮成纤维细胞、巨噬细胞中，且参与神经细胞迁移、创伤愈合及病毒与细菌的感染。此外，Hsp90α的分泌是肿瘤细胞侵袭功能的先决条件，阻断Hsp90α的分泌能够显著抑制肿瘤的转移。因此，血浆中Hsp90α的含量与临床癌症患者的肿瘤恶性程度正相关。

1.2热休克蛋白90α分泌的调控机制作为最丰富的细胞蛋白之一(约1%总蛋白)，Hsp90α主要在细胞质中，先前的研究也大多集中于Hsp90α在其胞质中的功能。另外，虽然研究较少，Hsp90α可以释放到细胞外的空间[1]。虽然胞外Hsp90α的存在很早就被观察到了，但由于缺乏N-末端的经典的分泌信号肽，其分泌被认为是以一种非常规的方式进行的。Wang X等[4]首次阐明了Hsp90α的分泌调控机制，认为分泌型的Hsp90α是一种C末端可被剪切的形式，同时，它的分泌被C末端的后四个氨基酸残基(EEVD)序列与含三角型四肽重复序列的蛋白之间的相互作用所调控，并且Hsp90α的分泌由第90位苏氨酸的磷酸化所决定，这种磷酸化受蛋白激酶A(PKA)和蛋白磷酸化酶5(PP5)调控。其中PKA是一个直接的、正向的Hsp90α分泌的调控子，其作为位点为Thr-90的磷酸化。正常情况下，细胞因子如VEGF、SDF、PDGF和应激条件如缺氧等通常会导致信号通路的激活，特别是激酶类的活化，因此细胞因子或缺氧的压力也可以刺激Hsp90α的分泌。而PP5是Hsp90α分泌的内源负调控子，它在抑制分泌过程中具有双重角色。研究表明， HSP90α也能够通过细胞表面叫做外来体的纳米囊泡被胞吐到细胞外[5]。

2　热休克蛋白90α与原发性肝癌的关系

2.1热休克蛋白90α对原发性肝癌的诊断价值长期以来，临床常用AFP作为原发性肝癌的肿瘤标记物，以诊断及监测原发性肝癌的进展。然而，随着对AFP作用机制及功能的深入研究，发现AFP对原发性肝癌的诊断缺乏特异性[6]。现有研究表明，Hsp90α在肝癌组织中高表达。Wang X等[1]研究者监测了肝癌患者的血浆，发现血浆中Hsp90α的含量相比于正常人显著升高。同样，李慧等研究者[7]也发现在肝癌患者血清中Hsp90α明显高于健康对照者(P=0.0001)。免疫组化学研究显示，Hsp90α在肝癌组织中表达明显高于癌旁组织[8]。黄红平等[9]曾成功构建了表达热休克蛋白90的真核表达质粒HA-HSP90，结果转染HA-HSP90的HepG2细胞内高水平表达外源性蛋白，而没有转染质粒的细胞内未见外源性蛋白的表达。这说明，Hsp90α在肝癌细胞内高表达。研究表明，原发性肝癌患者血清Hsp90α与肝癌肿瘤分化程度、肿瘤大小显著相关(P<0.05)，与病灶数目无关(P>0.05)；与预后有关，Hsp90α阴性患者预后显著优于Hsp90α阳性患者，术后平均无瘤生存期前者38.6个月、后者25.5个月(P<0.05)，这说明Hsp90α可作为判断原发性肝癌的临床分期及预后的指标[10]。综上分析，Hsp90α可作为原发性肝癌的肿瘤标记物，用于肿瘤的诊断和监测肿瘤术后复发。

2.2热休克蛋白90α对原发性肝癌的治疗价值众多研究表明，肝癌的转移与复发是导致肝癌较高病死率的重要原因，而且癌症转移是一个复杂的过程，它不仅在于肿瘤细胞的恶性程度，还在于细胞所在微环境产生的因子。秦荔荣等人[11]通过利用Ion ProtonTM测序仪比较人肝癌细胞株(Smmc-7721)和正常人肝细胞株(L-02)的差异表达基因，并且对差异表达基因进行聚类分析、基因功能注释和富集分析获得肝癌细胞转移相关基因，结果显示，Hsp90α在有门静脉转移的肝癌组织表达明显增强。该项研究提示Hsp90α是肝癌组织转移的重要基因。因此，有效抑制Hsp90α的表达，对抑制肿瘤转移有重要意义。此外，17-AAG可特异性结合Hsp90α，从而阻断Hsp90α介导的肿瘤细胞的增殖与转移的信号传导通路，达到抑制肿瘤的功能。有学者曾研究[12]Hsp90α抑制剂格尔德霉素(GA)对人肝癌细胞株BEL7404的凋亡作用，结果显示：GA对BEL7404细胞株有增值抑制作用，呈时间剂量依赖关系，且GA均可使BEL7404细胞株细胞周期阻滞于G0/G1期。这说明抑制Hsp90α的功能可引起肝癌细胞增值抑制与凋亡。与之类似的，有学者研究[13]了17-AAG对人肝癌HepG2细胞株增殖与凋亡作用的影响，同样发现17-AAG对肝癌细胞有增殖抑制、诱导凋亡的作用。王晓捷等[14]成功构建了有效靶向沉默Hsp90α基因表达的siRNA真核表达载体，通过使用靶向的Hsp90asiRNA，不仅有效抑制了Hsp90α在肝癌细胞中的表达，而且还特异地抑制了肝癌细胞的分裂增殖及导致G2/M期周期阻滞，为临床肝癌靶向基因治疗提供了理论依据。

3　前景与展望

热休克蛋白90α作为一种全新的有前途的恶性肿瘤标记物，也是一个肿瘤转移预后的潜在指标。韩晓红等人[15]已证明Hsp90α是一个非常有效的肺癌诊断生物标志物，并可预测肺癌患者的化疗治疗疗效。黄凌云等[16]研究发现，Hsp90α可以区分肺癌及良性肺部疾病患者和健康人，其灵敏性为0.817，特异性为0.919。也有研究显示[17]，Hsp90α可以作为潜在的胃癌标志物，与其他肿瘤指标联合，可大大提高胃癌诊断的灵敏度。临床观察显示，AFP联合Hsp90α比单用AFP诊断原发性肝癌的检出率要高。因此，Hsp90α可作为原发性肝癌诊断的肿瘤标记物之一，并且与其他肿瘤标记物联合应用可提高原发性肝癌的诊断。此外，对于原发性肝癌的治疗，除常规应用手术、介入、药物等疗法，可考虑通过抑制Hsp90α的表达抑制肿瘤的发生与发展。亦可通过Hsp90α术前及术后的随访，减少肿瘤复发，提高肝癌患者的生存期。

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邹志强，E-mail：zhiqiangzou@126.com

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