RNA干扰沉默STC-1基因对结肠癌细胞株HCT116增殖的影响
2016-12-13訾永宏李小宝陈红梅
訾永宏, 李小宝, 陈红梅
(1延安大学附属医院普外科,延安 716000;2延安职业技术学院医学系;*通讯作者,E-mail:ziyonghong2016@163.com)
RNA干扰沉默STC-1基因对结肠癌细胞株HCT116增殖的影响
訾永宏1*, 李小宝1, 陈红梅2
(1延安大学附属医院普外科,延安 716000;2延安职业技术学院医学系;*通讯作者,E-mail:ziyonghong2016@163.com)
目的 探讨RNA干扰技术沉默STC-1基因对结肠癌细胞株HCT116增殖的影响。 方法 将STC-1基因的si-RNA稳定转染至HCT116细胞;采用RT-PCR、Western blot鉴定干扰效果;以STC-1基因沉默细胞HCT116为实验组,以转染空质粒的HCT116细胞和空白的HCT116细胞为阴性对照和空白对照组,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、细胞倍增时间、平板克隆形成实验、流式细胞术等分析沉默STC-1基因后,HCT116细胞生长速度、细胞周期、克隆形成能力等的改变。 结果 MTT实验结果表明,沉默STC-1基因后,实验组细胞的生长速度明显下降;其细胞周期也发生改变G1期细胞增多、S期细胞减少。空白对照组、阴性对照组和实验组细胞平均倍增时间为分别为(3.718±0.82)h,(3.981±0.918)h,(5.018±0.981)h;空白对照组,阴性对照组和实验组平均细胞克隆形成数目分别为65.68±4.826,71.28±4.662,45.95±4.432。实验组与对照组相比较,平均倍增时间和平均细胞克隆形成数目差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 沉默 STC-1基因对结肠癌细胞HCT116的增殖具有重要的作用,这为进一步阐明结直肠癌发病机制奠定了坚实的基础。
RNA干扰; STC-1; 结肠癌; HCT116
斯钙素-1(stanniocalcin-1,STC-1)是一类先后在硬骨鱼、哺乳动物和人类中发现的糖蛋白激素,在调节钙、磷代谢,促进脑神经元的终末分化以及骨和肌肉的发育等方面都有重要作用[1,2]。近来研究发现,STC-1在人类肿瘤的发生发展过程中也起着十分重要的作用[3]。越来越多的研究表明,STC-1在结肠癌组织中的表达明显高于癌旁组织[4,5]。本实验前期也发现STC-1在结肠癌细胞株HCT116中高表达,但其对结肠癌发生过程中的作用目前还不十分清楚。……
