杨瑞梅，张传美，张洪亮，单 虎

(青岛农业大学动物科技学院，山东省预防兽医重点实验室，青岛 266109)



水貂阿留申病毒纳米PCR检测方法的建立与初步应用

杨瑞梅，张传美，张洪亮，单 虎*

(青岛农业大学动物科技学院，山东省预防兽医重点实验室，青岛 266109)

为建立便捷、灵敏的水貂阿留申病病毒(AMDV)纳米PCR检测方法，根据AMDVNS1基因的保守序列设计一对特异性引物，对纳米PCR反应的退火温度、胶体金浓度进行了优化；测序检测扩增基因是否发生变异；对特异性和灵敏度进行了评估。结果表明，此纳米PCR的最佳退火温度为51 ℃，普通PCR为55 ℃；加入胶体金最佳浓度在0.2～0.8 nmol·L-1，纳米PCR与普通PCR产物测序相似性大于99%。特异性检测表明该纳米PCR方法只扩增AMDV而不能扩增犬瘟热病毒和水貂肠炎细小病毒。在粪尿样品检测中该纳米PCR敏感性比普通PCR高10倍。检测40份临床样品，结果表明该方法比对流免疫电泳检测敏感性提高，从而为用粪、尿等低病毒样品检测水貂阿留申病提供了一种新的有效方法。

水貂阿留申病病毒；纳米PCR；检测

水貂阿留申病病毒(Aleutian mink disease virus, AMDV)属于细小病毒科阿留申貂病病毒属，主要引起水貂慢性感染性疾病。该病特征为病程缓慢、血清中丙种球蛋白表达量过度升高和肾小球肾炎。临诊上主要表现为病貂被毛粗乱，失去光泽，母貂受孕率及仔貂成活率降低，给养貂业造成极大损失[1-2]。目前尚无有效预防该病的疫苗，在防制方面主要采取检疫阳性貂并且淘汰的办法[3]。对流免疫电泳(CIEP)是国际上公认的检测此病抗体的方法[4]。……