山羊CC类趋化因子受体(CCR2)基因的克隆及组织表达分析
2016-12-13朱江江林亚秋
朱江江,林亚秋,王 永,2,李 倩,2,林 森,2
(1. 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室,成都 610041;2. 西南民族大学生命科学与技术学院,成都 610041)
山羊CC类趋化因子受体(CCR2)基因的克隆及组织表达分析
朱江江1,林亚秋2*,王 永1,2,李 倩1,2,林 森1,2
(1. 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室,成都 610041;2. 西南民族大学生命科学与技术学院,成都 610041)
本研究旨在克隆山羊CC类趋化因子受体基因(CCR2)的CDS区序列,并检测其在山羊不同组织中mRNA和蛋白表达水平,从而为CCR2基因在山羊脂代谢中的作用研究奠定基础。选取2~3周岁的健康简州大耳羊和藏山羊羯羊各4只,屠宰后分别采集心、肝、脾、肺、肾、肌肉和皮下脂肪组织,分别提取组织总RNA及总蛋白,利用RT-PCR法克隆山羊CCR2基因序列,进行生物信息学分析,并利用实时定量PCR法和Western blot分别检测CCR2基因mRNA和蛋白的表达水平。结果显示,克隆得到CCR2基因cDNA序列1 186 bp,包含CDS全长1 100 bp,5′ UTR 2 bp 和3′ UTR 74 bp,编码370个氨基酸残基。山羊CCR2氨基酸序列与牛、猪、小鼠、人的相似性分别为97.3%、91.9%、77.0%和69.2%。山羊CCR2基因与牛具有最近的亲缘关系,其次为猪、狗和小鼠,而与人的亲缘关系较远。组织表达结果显示,CCR2在两种山羊肾和心中均具有较高的表达水平,而在皮下脂肪和肌肉中的表达水平较低。这些结果表明,CCR2可能在山羊脂质代谢过程中具有重要的调控作用。
山羊;CCR2;克隆;组织表达
随着人们消费水平的提高和对绿色、健康生活饮食的倡导,羊肉因为味美、低胆固醇以及营养丰富而越来越深受人们的喜爱[1-3]。肌内脂肪(IMF)是山羊肉质的重要影响因素,与肉的嫩度、风味以及多汁性等性状紧密相关[4]。……
