邵继平 张彩云 胡不为 谢学立 田树红 王日超 黄道隆 符 健

(海南医学院药物安评中心，海口571199)



·免疫学技术与方法·

ELISA法检测食蟹猴血浆中rhCNB多肽的方法学评价①

邵继平 张彩云 胡不为②谢学立 田树红 王日超 黄道隆 符 健

(海南医学院药物安评中心，海口571199)

目的：酶联免疫吸附法(ELISA)定量测定食蟹猴血浆中rhCNB多肽的方法学评价。方法：利用双抗体夹心ELISA法，对rhCNB多肽的方法学灵敏度、线性范围、精密度与准确度和回收率进行方法学验证。结果：该方法特异性高，在0.195～12.5 ng/ml的线性范围内，线性关系良好，标准曲线方程为Y = 15.1X-0.26，R2=0.996 8，定量下限(LLOQ)为0.195 ng/ml；该方法的批内精密度CV分别为3.55%、1.39%和4.71%；批间精密度CV分别为1.59%、3.2%和3.8%，均<5%，准确度在91.9%～108.8%之间，方法回收率在88.5%～108.3%之间，<110%，说明该ELISA方法的准确度较高。符合验证要求。结论：双抗体夹心ELISA法灵敏度高、通量大、重复性、准确度及精密度好，可用于生物样品中rhCNB多肽的定量检测。

酶联免疫吸附法；食蟹猴；rhCNB多肽；方法学评价

肝癌(Liver cancer)是严重危害我国人民健康的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率仅次于胃癌和食道癌，耐药、复发和转移成为肝癌患者死亡的主要原因。晚期患者往往陷入无药可救的绝境，在我国中位生存期仅3～6个月，在欧美也仅6～9个月，预后很差。

虽然治疗肝癌的药物众多，但大多数药物毒副作用大。目前临床上肝癌药物最大的缺点是缺乏组织选择性，在体内广泛分布，在发挥疗效的同时产生严重的全身性毒副作用。因此寻找高效低毒的新型抗癌药迫在眉睫。

钙调磷酸酶(Calcineurin，CN)是目前唯一一种依赖Ca/CaM(钙调素)的蛋白磷酸酶，由A、B亚基以1∶1的比例组成异二聚体，A亚基(CNA)是催化亚基，B亚基(CNB)是调节亚基。CNB作为该酶的调节亚基，能促进CNA的活性，且相对分子质量小，性质稳定。……