马琳园 隋 御 马 璐 李 昕 李元杰 徐 方

(宁夏医科大学宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室，银川750004)



MMS2和P53基因对结肠癌细胞增殖与凋亡的影响①

马琳园 隋 御 马 璐 李 昕 李元杰 徐 方

(宁夏医科大学宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室，银川750004)

目的：探讨MMS2 siRNA 与P53 siRNA 对人高分化结肠癌细胞(THC-8307)的增殖与凋亡的相互调控作用。方法：以实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、蛋白印迹法(Western blot)分析检测细胞转染效率，选择沉默效率具有统计学意义的THC-8307细胞作为实验组，同时将未作处理的THC-8307作为空白对照，转染空质粒细胞作为阴性对照。采用qRT-PCR及Western blot分别检测干扰各组目的基因后其两基因相互关系及表达量。采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率，以明确其对结肠癌细胞增殖与凋亡的作用。结果：实验组与对照组相比，分别沉默MMS2基因与P53基因的结肠癌细胞内P53与MMS2的 mRNA与蛋白水平显著升高(P<0.05)。沉默MMS2实验组其早期凋亡与晚期凋亡率增加(P<0.05)。结论：MMS2和P53在结肠癌细胞增殖与凋亡方面起反向调控作用。

MMS2;P53;RNA干扰;人结肠癌细胞;细胞凋亡

结肠癌(Colorectal cancer,CRC)是常见的恶性肿瘤之一。据最新统计学分析显示，全球范围内，结肠癌的发病率和死亡率均位列第三位[1]，新增病例以每年超过100万例的速度递增[2]。在我国，结肠癌是最常见的恶性肿瘤,仅次于胃癌和食道癌并且逐年来其发病率呈上升趋势 ，在部分发达城市甚至已经达到消化道肿瘤的第二位[3,4]。既往研究表明，致癌物的暴露所导致的基因突变以及由基因突变累积引起的细胞突变是结直肠癌发生的根本原因[5],机体对此会进行自我修复——DNA损伤耐受修复(DNA-damage tolerance，DDT)，曾经被称为复制后修复(Post replication repair，PRR)。……