谭家余 黄 湘 陈敬林 钟裕恒

(南方医科大学第三临床医学院 南方医科大学附属中山博爱医院，中山528403)



·生物治疗·

HSPC238对HMOX1、RPS27a、MT2A、UBB调节的初步研究①

谭家余 黄 湘 陈敬林 钟裕恒

(南方医科大学第三临床医学院 南方医科大学附属中山博爱医院，中山528403)

目的：探讨HSPC238过表达或低表达对目标蛋白(HMOX1、MT2A、UBB、RPS27a)的调节作用及其调节途径。方法：分别构建HSPC238的干扰载体及高表达载体，脂质体法转染HEPG2细胞株，RT-PCR、Western blot检测HSPC238及目标蛋白的mRNA、蛋白的表达量；进一步用目标蛋白的高表达质粒分别转染低表达及高表达HSPC238的HEPG2细胞株，实验组另以蛋白酶体抑制剂MG132处理细胞，镍柱纯化目标蛋白，以HSPC238做免疫印迹，检测目标蛋白累积情况。结果：外源性干扰HSPC238后HMOX1、MT2A、RPS27a表达下调较明显，外源性过表达HSPC238后MT2A、UBB、RPS27a表达水平明显上调；目标蛋白的高表达质粒分别转染低表达及高表达HSPC238的HEPG2细胞株，实验组以蛋白酶体抑制剂MG132处理细胞后，与对照组比较，泛素化的目标蛋白条带明显增加。结论：过表达HSPC238可上调MT2A、UBB、RPS27a的表达，干扰HSPC238可下调HMOX1、MT2A、RPS27a的表达；HSPC238可能通过泛素蛋白酶体途径(Ubiquitin-proteasome pathway，UPP)对目标蛋白发挥调节作用。

HSPC238；泛素蛋白酶体途径；目标蛋白

HSPC238蛋白(hypothetical protein LOC51255，ring finger protein 181，NP_057578)是由LOC51255基因(NM_016494)编码的含153个氨基酸的，包含RING指(RING-type zinc finger)结构域的蛋白质，属于C3HC4型锌指蛋白，其特殊的结构提示该蛋白可能参与泛素蛋白酶体途径。本课题组在前期研究中发现，HSPC238蛋白在体内外均可明显抑制肝癌细胞的生长[1]，并进一步通过酵母双杂交的方法筛选到了与HSPC238相互作用的目标蛋白(HMOX1、MT2A、UBB、RPS27a)[2]。本研究拟进一步探讨HSPC238对目标蛋白的调节及其调节途径，为深入研究HSPC238在肝癌发生中的作用机制奠定基础。……