王 平 刘芳芳 李俊莲 马彦平 张晓薇 李艳彦 张维骏 陶功定

(山西中医学院，太原030619)



正常组与人工模拟寒环境组大鼠肺组织蛋白组学差异分析

王 平 刘芳芳 李俊莲 马彦平 张晓薇 李艳彦 张维骏 陶功定

(山西中医学院，太原030619)

目的：探讨正常组与人工模拟寒环境组大鼠肺组织蛋白组学差异表达及质谱分析。方法：选取20只SD大鼠随机分为正常对照组与寒环境组，每组10只。寒环境组模型复制使用人工气候箱：(T)=(6±2)℃，每天刺激4 h(其余时间为正常组温湿度)；正常组(T)=(21±2)℃，每天持续24 h。造模7 d后，两组大鼠于麻醉前12 h禁食、禁水，称量体重。麻醉后开胸取出左肺组织10 mg /只，每组取3个样本进行样品蛋白质制备、双向电泳实验、图像分析、质谱检测。结果：对两组差异蛋白图谱进行蛋白质组学分析,鉴定出9个蛋白在两组之间差异表达,寒环境组与正常对照组比较，其中4个表达上调、5个表达下调。结论：通过蛋白质组学分析，鉴定出的蛋白与外寒环境有相关性。

寒环境；肺组织；蛋白组学；差异分析

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 主要试剂 CHAPS、尿素、丙烯酰胺、三羟甲基氨基甲烷、硝酸银、二硫苏糖醇(DTT)、碘乙酰胺(-20℃保存)、TEMED、痕量溴酚蓝、IPG胶条等。

1.1.2 主要仪器设备 冷冻离心机、固相pH梯度等电聚焦仪、垂直板电泳仪凝胶图像扫描仪、MALDI-TOF-MS(Bruker公司的Auto-Reflex型质谱仪)等。

1.1.3 动物分组与造模 适应性饲养7 d后，将20只SD大鼠随机分为正常对照组与人工模拟寒环境组，每组10只。自由进食饮水。参照文献[1]方法，使用人工气候箱模拟寒环境气候，将大鼠置于环境相应的人工气候箱内，寒环境组：(T)=(6±2)℃，每天刺激4 h(其余时间为正常组温湿度)；……