舒易来陶永李文妍陈正一李华伟

·论著·

腺病毒转染新生及成年鼠内耳细胞的研究

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目的 探讨腺病毒携带目的基因Cre和Oct4导入新生和成年小鼠转染内耳细胞的可行性，为内耳基因治疗提供可行性研究。方法 采用纳升级显微操作系统，经耳蜗中阶显微注射携带基因编辑基因Cre和绿色荧光蛋白（GFP）基因的5型重组腺病毒悬液于新生鼠（P1）和成年鼠，并以腺病毒携带Oct4基因转染入成年鼠内耳，注射4 d后取双侧耳蜗标本做基底膜铺片，观察GFP和Oct4表达情况。结果 新生鼠组：术后第4 d见耳蜗底圈62﹪和中圈54﹪支持细胞表达GFP。成年鼠组：术后第4天可见耳蜗底圈96﹪和中圈51﹪内毛细胞表达GFP，底圈72﹪和中圈40﹪支持细胞表达GFP。31﹪内毛细胞和43﹪支持细胞表达Oct4。未注射耳未见GFP和Oct4表达。结论 显微注射腺病毒携带目的基因Cre和Oct4可高效导入新生鼠及成年鼠内耳并表达，可用来研究内耳基因功能和基因治疗。

腺病毒科； 耳蜗； 内耳； 基因疗法

据2006年我国第二次残疾人抽样调查显示，我国听力残疾人达2 780万，并且还在不断增加[1]。耳聋可大致分为3种类型：传导性耳聋、感音神经性耳聋和混合性耳聋。感音神经性耳聋是由于耳蜗Corti氏器毛细胞、听神经、听传导径路或各级神经元受损害，致声音的感受与神经冲动传递障碍。因噪音、耳毒性药物、遗传、感染和自身免疫性疾病等引起的毛细胞丢失或毛细胞、支持细胞等功能缺失引起的感音神经性耳聋占很大一部分，哺乳动物的耳蜗毛细胞在死亡后不能再生。……