石宇雄，郭智维，缪莉，谭志琴

(中国人民解放军第169医院，湖南衡阳 421002)



转染miR-185类似物的人胃腺癌MGC-803细胞增殖能力及M2型丙酮酸激酶表达变化

石宇雄，郭智维，缪莉，谭志琴

(中国人民解放军第169医院，湖南衡阳 421002)

目的 观察转染miR-185类似物的人胃腺癌MGC-803细胞增殖能力及M2型丙酮酸激酶(PKM2)表达变化。方法 培养人胃腺癌MGC-803细胞，将其分为观察组1、对照组1、观察组2、对照组2，观察组1转染miR-185类似物，对照组1转染无关序列，观察组2转染PKM2小RNA干扰，对照组2转染RNA干扰无关序列，48 h后收集观察组1和对照组1细胞，用Western blotting法检测PKM2蛋白，用实时荧光定量PCR法检测PKM2 mRNA;将四组细胞继续培养24、48、72、96 h，采用MTT法测量各组在570 nm波长处的OD值。结果 细胞培养48、72、96 h时，OD值观察组1较对照组1低(P均<0.05)，观察组2较对照组2低(P均<0.05)。观察组1、对照组1人胃腺癌MGC-803细胞PKM2蛋白相对表达量分别为0.522±0.065、0.937±0.111，PKM2 mRNA相对表达量分别为0.584±0.037、1.046±0.058，两组比较，P<0.05或<0.01。结论 转染miR-185类似物的人胃腺癌MGC-803细胞增殖能力下降、PKM2表达降低，miR-185的这一作用是通过下调PKM2实现的。

微小RNA-185类似物；基因转染；胃癌；人胃腺癌MGC-803细胞；M2型丙酮酸激酶；细胞增殖

miRNA是一类在真核生物中广泛表达且具有调控功能的非编码RNA，由18～25个核苷酸组成。miRNA通过促进其靶mRNA降解或抑制其翻译，在转录后调控基因的表达，从而参与调控生物体的一系列生理病理过程[1]。miRNA参与多种肿瘤发生发展过程，这可能与其参与调控细胞线粒体功能(如能量代谢、细胞凋亡、分裂/融合等)有关。研究[2～5]显示，miR-185在胶质瘤、卵巢癌、肺癌、肝细胞癌、结肠癌以及横纹肌肉瘤等肿瘤组织或细胞中表达下调，且能抑制多种肿瘤细胞的生长与侵袭。miR-185在胃癌组织和细胞中表达下调，且miR-185在胃癌组织中表达与患者临床分期、淋巴结转移以及预后相关，体外实验证实外源高表达miR-185可抑制胃癌细胞的增殖、侵袭并诱导胃癌细胞凋亡，体内实验亦证实miR-185能抑制癌细胞肺转移[6]。……