张艳 李海龙 王虎平 顾静 马春林 吴红彦

摘要：目的 观察阿魏酸对人胃癌MGC-803细胞增殖的影响，探讨其诱导胃癌细胞凋亡的作用机制。方法 不同浓度阿魏酸干预体外培养人胃癌MGC-803细胞，作用24、48、72 h后，MTT法检测细胞增殖；不同浓度（0、5、7.5、10 mg/mL）阿魏酸作用MGC-803细胞48 h，Annexin V-FITC/PI法和流式细胞仪检测细胞凋亡，RT-qPCR和Western-blot检测Capase-3、Capase-9、Bax、Bcl-2和Xiap的mRNA和蛋白表达。 结果 与对照组比较，5、7.5、10、12.5 mg/mL阿魏酸作用MGC-803细胞的OD值明显降低，阿魏酸抑瘤作用明显，阿魏酸作用MGC-803细胞24、48、72 h的IC50分别为12.93、9.73、5.52 mg/mL；5、7.5、10 mg/mL阿魏酸作用MGC-803细胞48 h后均能诱导MGC-803细胞凋亡，5、7.5、10 mg/mL阿魏酸均能上调Capase-3、Capase-9和Bax的mRNA和蛋白表达，下调Bcl-2和Xiap的mRNA和蛋白表达。结论 阿魏酸能有效抑制MGC-803细胞增殖，并能诱导MGC-803细胞凋亡，其作用机制与内源性线粒体凋亡途径和下调Xiap的表达有关。

关键词：阿魏酸；胃癌；细胞增殖；细胞凋亡

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2016.09.017

中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2016）09-0070-04

Effects of Ferulic Acid on Gastric Cancer Cell Line MGC-803 Proliferation ZHANG Yan1， LI Hai-long2， WANG Hu-ping1，2， GU Jing2， MA Chun-lin1，2， WU Hong-yan1，2 （1. Basic Medical School， Gansu University of Chinese Medicine， Lanzhou 730000， China； 2. Key Laboratory of Traditional Chinese Herbs and Prescription Innovation and Transformation of Gansu Province， Key Laboratory for TCM New Products Development Engineering of Gansu Province， Lanzhou 730000， China）

Abstract： Objective To explore the effects of ferulic acid on gastric cancer cell line MGC-803 proliferation； To discuss the mechanism of apoptosis induced by ferulic acid. Methods Ferulic acid with a variety of concentrations was used to treat gastric cancer cell line MGC-803 for 24， 48， 72 h； MTT experiment was used to detect the growth of gastric cancer cells. After gastric cancer cell line MGC-803 were treated with ferulic acid with a variety of concentrations （0， 5， 7.5， 10 mg/mL） for 48 h， all gastric cancer cells were collected and stained by Annexin V-FITC/PI for the detection of apoptosis by flow cytometry. RT-qPCR and Western-blot methods were used to detect mRNA and protein levels of Caspase-3， Caspase-9， Bax， Bcl-2 and Xiap. Results Compared with the control group， the OD value of cell line MGC-803 treated by ferulic acid with a variety of concentrations （5， 7.5， 10， 12.5 mg/mL） decreased significantly； the anti-tumor effect of ferulic acid was obvious； IC50 of 24， 48， and 72 hours after treated by ferulic acid was 12.93， 9.73 and 5.52 mg/mL respectively. Cell lineMGC-803 treated by ferulic acid with a variety of concentrations （5， 7.5， 10 mg/mL） after 48 h could induce the apoptosis of MGC-803 cells， up-regulate mRNA and protein levels of Caspase-3， Caspase-9， and Bax， down-regulate mRNA and protein levels of Bcl-2 and Xiap. Conclusion Ferulic acid can inhibit the proliferation of MGC-803 cells effectively and induce the apoptosis of MGC-803 cells， which mechanism is related to mitochondria apoptosis pathway and the down-regulation of Xiap expression.

Key words： ferulic acid； gastric cancer； cell proliferation； cell apoptosis

阿魏酸是多种中药如川芎、当归、升麻、木贼、蒲公英、酸枣仁等的有效成分之一，现代药理研究表明，阿魏酸具有抗氧化、抗动脉粥样硬化、抗炎、抗凝、解毒、保肝、调节免疫等功效[1]。近年来研究发现，阿魏酸乙酯可抑制胃癌SGC-7901细胞增殖并且诱导凋亡[2]。然而，阿魏酸是否可抑制胃癌SGC-7901细胞增殖并且诱导凋亡尚不清楚。本实验拟用阿魏酸干预胃癌MGC-803细胞，观察其对胃癌细胞增殖的影响，并探讨其诱导胃癌细胞凋亡的机制。

1 实验材料

1.1 细胞株

胃癌MGC-803细胞，北京协和肿瘤研究所。

1.2 主要试剂与仪器

高糖DMED培养基（健顺生物公司），胎牛血清（杭州四季青公司），阿魏酸（上海紫一试剂厂），反转录试剂……