宋莎莎 孙 洋 李新宇 王永芳

·论著·

5-ALA-PDT法在HPV11.HaCaT细胞模型中的应用

宋莎莎 孙 洋 李新宇 王永芳

目的: 确定光动力疗法(5-ALA-PDT)对携带HPV11全基因组的HaCaT细胞(HPV11. HaCaT)模型的影响。方法: HPV11.HaCaT细胞培养传代后分别用不同浓度5-ALA(0.375、0.75、1.5、3 mM)，或不同剂量红光(10、20、40 J/cm2)，或不同浓度5-ALA结合不同剂量红光处理。用MTT法检测细胞增殖，实时荧光定量PCR测定HPV11早期基因E5、E6和E7mRNA的表达。结果: 0.75mM以上浓度的5-ALA联合20或40 J/cm2红光，细胞存活率均在50%以下(P＜0.01)。0.375mM 5-ALA联合20 J/cm2红光能明显降低HPV11 E6和E7mRNA表达，相对表达量为0.28和0.26(P＜0.01)，而0.75mM 5-ALA联合20 J/cm2红光处理对HPV11 E6和E7mRNA表达影响不明显，相对表达量为0.85和1.46(P＞0.05)，但以上两种处理条件对HPV11 E5 mRNA的表达均无明显影响。结论: 5-ALAPDT法应用于HPV11.HaCaT细胞模型能抑制HPV11.HaCaT细胞增殖，并能降低该细胞中HPV11 E6、E7mRNA的表达。

HPV11.HaCaT； 尖锐湿疣； 光动力疗法； 细胞增殖； 早期基因

人乳头瘤病毒(Human papilloma virus，HPV)是在鳞状上皮复制的双链环状DNA病毒，可通过与感染皮肤接触传播。根据HPV致恶性程度的不同，分为高危型(如 HPV16、HPV18等)和低危型(如HPV6、HPV11等)两类。因高危型HPV的致癌性，基础和临床研究较多，相对而言低危型HPV的研究较少。尖锐湿疣(Condyloma acuminatum，CA)是我国性传播疾病中位居第三位的疾病[1]，主要由低危型HPV(90%以上为HPV6/11)感染引起，以皮肤、黏膜部位出现疣状增生性病变为特征。目前临床上CA的治疗主要通过激光、冷冻、手术或局部用药，以去除肉眼所见的疣体为主，而直接针对病原体本身的抗HPV药物尚无，这亦是HPV潜伏感染以及CA容易复发的原因之一。由于HPV高度的种属特异性以及其生长周期与宿主细胞分化状态的密切相关性，迄今为止，HPV不能在动物体成功接种和生长，也无法在体外组织培养系统中繁殖，这是制约HPV深入研究以及抗HPV药物研发的重要因素。……