江 涛 马 良 张宇昊 王佳曼

(西南大学食品科学学院，重庆 400715)



光谱法研究黄曲霉毒素B1与人血清白蛋白的结合反应

江 涛 马 良*张宇昊 王佳曼

(西南大学食品科学学院，重庆 400715)

黄曲霉毒素B1(AFB1)是目前发现的致癌能力最强的真菌毒素，严重危害人畜健康。人血清白蛋白(Human serum albumin, HSA)在结合、运输内源性和外源性等小分子物质方面具有重要的生理功能。研究AFB1与HSA的相互作用机理和作用过程，在分子毒理学上具有重要意义。本研究模拟在人体血液pH条件(pH 7.4，离子强度 0.1 mol/L), 通过荧光淬灭、3D荧光法和圆二色谱(Circular dichroism, CD)等光谱方法研究AFB1与人血清蛋白的相互作用。结果表明, AFB1与HSA的内源荧光淬灭属于静态淬灭，AFB1-HSA在298, 303, 308和313 K 4个温度条件下，结合常数均为104数量级，结合位点都约为1。根据Van′t Hoff方程，AFB1-HSA体系是熵增焓减的自发过程，分子间主要作用力为疏水作用和氢键。基于Förster′s能量转移，得知AFB1与HSA结合距离为3.31 nm。竞争结合实验表明，AFB1结合在HSA的siteI位点上，靠近色氨酸Trp-214。通过 3D荧光分析，AFB1的结合作用导致了HSA氨基酸残基微环境和二级构象发生变化。圆二色谱的分析结果表明,二者的结合使得HSA的α-螺旋含量增加。

黄曲霉毒素B1；人血清白蛋白；结合反应；光谱法

1 引 言

霉菌毒素中黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1, AFB1)是目前已知的最强化学致癌物之一，能通过多种途径污染粮油等农产品、食品和饲料等，直接或间接进入人类食物链[1]。据估计，全球约有50亿人暴露于高水平的AFB1中[2]。血清白蛋白占整个血浆蛋白的52%～60%，是循环系统中主要的可溶性蛋白组分，能结合、运输许多内源性和外源性的化合物[3]，且可与外源性物质在特异性结合部位形成非共价复合物。……