马雨楠，游颖，沈欢欢，孙兆增，曾林，法云智

(军事医学科学院实验动物中心，北京 100071)



Noggin基因沉默对BMP和Wnt信号通路表达的影响

马雨楠，游颖，沈欢欢，孙兆增，曾林*，法云智*

(军事医学科学院实验动物中心，北京 100071)

目的 检测分析Noggin基因沉默对毛囊发育中BMP和Wnt信号通路的影响。方法 采用实时荧光定量PCR和western blot技术对Noggin基因沉默的MC3T3-E1稳转细胞系中BMP-2、BMP-4、BMPR-IA、BMP-6、BMP-7、LEF-1、β-catenin的表达情况进行检测分析。 结果 实时荧光定量PCR结果显示，BMP信号通路中的五个基因的表达都受到Noggin基因沉默的显著的影响，其中BMP-2(P<0.001)、BMP-4(P<0.01)、BMP-6(P<0.001)、BMP-7(P<0.001)表达量均升高；BMPR-IA(P<0.01)表达量降低。同时Wnt信号通路中的两个基因LEF-1(P<0.001)、β-catenin(P<0.001)的表达也都显著降低。Western blot结果显示，两条信号通路中这几种蛋白的表达也都受到影响，其中显著升高的有BMP-2(P<0.05)、BMP-4(P<0.05)、BMP-6(P<0.05)和BMP-7(P<0.05)；显著降低的是β-catenin(P<0.05)、BMPR-IA(P<0.01)和LEF-1(P<0.001)。结论 在体外Noggin基因对BMP信号通路可能存在反馈性抑制机制，而对Wnt信号通路存在反馈性激活机制，为下一步探究在体内Noggin基因对BMP和Wnt信号通路表达的作用提供一定的依据。

Noggin基因；BMP信号通路；Wnt信号通路；毛囊

毛囊(hair follicle，HF)被认为是一种由外胚层中胚层相互作用形成的微型器官[1]。HF形态发生是在早期胚胎阶段开始的。Uncv无毛小鼠是由于常染色体基因突变导致其HF发育缺陷而产生的无毛性状。Uncv突变引起的小鼠毛囊发育缺陷是有助于研究HF发育调控的关键因素。HF形态的正常发育和规律周期取决于Wnt信号通路[2,3]、BMP信号通路[4-6]、Shh信号通路[7]、Notch信号通路[8]以及最近发现的mTOR信号通路[9]在上皮和间充质细胞之间的相互作用[10]。其中Wnt在诱导HF形成的过程中起着至关重要的作用，BMP主要参与细胞的分化，Shh参与形态发生及后期的分化，Notch决定干细胞的命运，而mTOR信号通路在毛发再生过程中能够促进干细胞的活化[11]。

已有研究资料表明Noggin基因在HF的发育过程中发挥了重要作用[12]。本实验借助之前构造的Noggin基因沉默表达载体，对影响HF发育信号通路中BMP和Wnt两条信号通路中相关因子进行分析，探索研究Noggin基因对HF形态发育相关信号通路的影响，以便于研究Uncv无毛小鼠毛囊发育信号通路的调控，分析其在毛囊发育调控中的作用和机理。……