余慧镭，殷晓雪，陈仲强，冷慧杰，宋纯理，刘忠军

(北京大学第三医院骨科，北京 100191)



基因沉默组织型转谷氨酰胺酶抑制SaOS-2细胞成骨分化

余慧镭，殷晓雪*，陈仲强，冷慧杰，宋纯理，刘忠军

(北京大学第三医院骨科，北京 100191)

目的 研究组织型转谷氨酰胺酶(tissue transglutaminase, TG2)是否参与人SaOS-2细胞系成骨分化过程。 方法 使用携带短发夹RNA(short hairpin RNA, shRNA)的慢病毒转染SaOS-2细胞以敲减TG2表达，以SaOS-2细胞及转染了含阴性对照shRNA病毒的SaOS-2作为对照组，分别进行体外成骨诱导培养，并进行以下检测：诱导14 d后各组矿化情况(茜素红染色)；诱导4、7 d后碱性磷酸酶活性及I型胶原、骨钙素、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)的mRNA表达，并与诱导前的表达水平相比较。 结果 SaOS-2细胞组及转染阴性对照shRNA组在体外成骨诱导过程中I型胶原、骨钙素、BMP-2的mRNA表达和ALP活性逐渐增加，14 d时形成明显矿化结节，而TG2敲减后的SaOS-2细胞在诱导14 d时矿化水平显著低于对照组，诱导7 d时ALP活性及I型胶原、骨钙素、BMP-2的mRNA表达水平显著低于对照组。结论 组织型转谷氨酰胺酶参与SaOS-2细胞体外成骨分化及矿化。

组织型转谷氨酰胺酶；SaOS-2细胞；成骨分化

转谷氨酰胺酶是一组催化转酰胺反应的酶，由9个成员组成，其中组织型转谷氨酰胺酶(tissue transglutaminase, TG2)分布广泛，功能多样，近年来研究表明它可能在矿化与骨化过程中发挥重要作用[1]。TG2在肥大软骨细胞、成骨细胞、骨细胞和成牙质细胞中均有表达[2-3]，与软骨细胞分化和基质矿化相关[4]，参与软骨细胞向肥大前阶段的转化[5]。源于软骨细胞的TGs能促进前成骨细胞的矿化，而TG活性抑制剂能抑制体内外的成骨细胞分化及矿化[6-7]。……