杨 琴，丛 林， 袁 静，方慧琴，陈 薇，李 松，李 琴



TGA与LPS竞争抑制妊娠期糖尿病孕妇外周血单核细胞TLR4经典信号通路

杨 琴，丛 林， 袁 静，方慧琴，陈 薇，李 松，李 琴

目的 研究半乳糖醛酸(TGA)与内毒素(LPS)同时刺激妊娠期糖尿病孕妇外周血单核细胞及其对LPS-Toll样受体4(TLR-4)-核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的抑制作用。 方法 选取妊娠期糖尿病孕妇30例，抽取外周静脉血15 ml，分离出单核细胞，分别加入LPS、TGA、TGA(0～1.0 mg/ml)联合LPS刺激并培养，Western blot法检测TLR4及NF-κB p65蛋白表达量，ELISA法检测培养液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1(IL-1)、白介素-10(IL-10)水平。 结果 单独LPS或TGA刺激，其下游TLR4、NF-κB p65蛋白表达量及TNF-α、IL-1、IL-10水平均较未处理组高，差异有统计学意义(P<0.05)；同时加入TGA及LPS刺激，其TLR4、NF-κB p65蛋白表达量及TNF-α、IL-1、IL-10水平均较单独LPS或TGA刺激低，但较未处理组高，差异均有统计学意义(P<0.05)；各组TLR4与NF-κB p65蛋白表达量之间呈正相关性(P<0.01)。结论 TGA与LPS可竞争抑制LPS-TLR4-NF-κB信号通路，对妊娠期糖尿病的预防及治疗起到指导作用。

半乳糖醛酸；内毒素；妊娠期糖尿病；TLR4信号通路

妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus，GDM)所带来的不良妊娠结局及远期影响危害较大，近年越来越引起大家的关注，对其机制的研究也越来越多。研究[1]表明GDM与免疫炎症相关，认为GDM是一种慢性低度炎症性疾病。前期研究[2]表明GDM孕妇体内Toll样受体4(Toll-like receptor-4，TLR-4) mRNA、核转录因子-κB(nuclear transcription factor，NF-κB) mRNA呈高表达，炎症因子升高，提示存在免疫炎症，内毒素(lipopolysaccharide，LPS)-TLR4-NF-κB信号通路介导了大量炎症因子释放，可能参与了GDM的发病。基于此可针对TLR4信号通路进行调控，观察其是否对GDM有影响，有研究者运用半乳糖醛酸(trigalacturonic acid，TGA)类物质调控TLR4信号通路并对其分子机制做了探讨[3]。该实验即应用TGA对LPS-TLR4-NF-κB信号通路进行调控，并探讨其与GDM的关系。

1 材料与方法

1.1 实验分组 GDM孕妇30例，纳入标准参照国际妊娠合并糖尿病研究组(IADPSG)标准[4]，年龄21～34(28.20±3.46)岁，孕24～28(25.83±1.14)周。未做任何处理的作为空白对照组，只加LPS(1 μg/ml)刺激作为LPS组，只加……