林晓璐 张红 夏小慧 陈娟 张日东 章向成 李伟

·论著·

Exendin-4对高糖培养肾小球系膜细胞ECM分泌的影响及相关机制

林晓璐 张红 夏小慧 陈娟 张日东 章向成 李伟

目的研究exendin-4对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)细胞外基质分泌的影响及相关机制。方法体外培养GMCs，分为4组：正常对照组(NC组)、正常对照+exendin-4组(NCE组)、高糖组(HG组)、高糖+exendin-4组(HGE组)；HGE组细胞分别给予3，5，10，15，30 nmol/L exendin-4培养12，24，48 h，采用细胞增殖与活性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8，CCK8)法测定细胞增殖情况，确定exendin-4的最适作用时间与浓度。ELISA测定细胞上清中细胞外基质蛋白纤维连接蛋白(FN)和Ⅳ型胶原蛋白水平。RT-PCR检测FN、Ⅳ型胶原蛋白及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA的表达。Western印迹测定核因子-κB的表达。结果(1)高糖培养的GMCs给予10 noml/L exendin-4培养24 h后，其细胞增殖率较3 nmol/L、5 nmol/L的exendin-4明显降低(F=120.808,Plt;0.05)；与15 nmol/L、30 nmol/L相比，10 noml/L(HGE组)的exendin-4对GMCs增殖率无明显变化(P均gt;0.05)。(2)与NC组、NCE组相比，HG组FN、Ⅳ型胶原蛋白分泌及mRNA以及MCP-1、TNF-α、ICAM-1、TGF-β1mRNA的表达均显著升高(F=6.894～166.914,P均lt;0.05)；与HG组相比，HGE组FN、Ⅳ型胶原蛋白分泌及mRNA以及TNF-α、MCP-1、ICAM-1、TGF-β1mRNA表达量明显降低(F=6.894～166.914，P均lt;0.05)。(3)与NC组、NCE相比，HG组核因子-κB蛋白的表达明显增多(F=133.1，Plt;0.05)。与HG组相比，HGE组核因子-κB蛋白的表达则明显受到抑制(F=133.1,Plt;0.05)。结论Exendin-4抑制高糖培养GMCs的细胞外基质分泌，与其抑制核因子-κB介导的炎性反应有关。

Exendin-4；肾小球系膜细胞；炎症；核因子-κB

糖尿病肾病(DN)是糖尿病慢性微血管并发症之一，其基本病理改变为系膜细胞增生、基底膜增厚、细胞外基质(ECM)积聚及肾小球硬化、肾脏纤维化，最终导致肾功能衰竭。代谢紊乱和血流动力学异常作为启动子，激活了肾组织内多种炎性分子及炎性信号通路，这些因素共同导致了肾脏的结构和功能的异常[1]。……