马改妮，刘　珂，郇贝丽，魏建超，邵东华，李蓓蓓，邱亚峰，石元元，马志永

（中国农业科学院上海兽医研究所，上海200241）

猪谷氧还蛋白I（GLRX1）基因实时荧光定量PCR检测方法的建立

马改妮，刘珂，郇贝丽，魏建超，邵东华，李蓓蓓，邱亚峰，石元元，马志永

（中国农业科学院上海兽医研究所，上海200241）

本研究针对猪GLRX1设计特异性引物，将PCR 扩增片段分别连接至T-easy 载体上构建重组质粒，经筛选、鉴定纯化后，10倍梯度稀释作为质控样品，用于实时荧光定量PCR中GLRX1标准曲线的构建，并进行反应的灵敏性、特异性和重复性试验。结果显示标准曲线线性关系R2值均在0.99 以上；特异性结果表明只能检测到猪GLRX1扩增曲线；组内和组间变异系数均小于5%。本研究初步建立了检测猪GLRX1基因的SYBR Green荧光定量RT-PCR的方法，为后续对猪传染性疾病与猪GLRX1之间相互关系的研究提供了一种特异、灵敏的检测方法。

猪谷氧还蛋白；SYBR GreenⅠ；实时荧光定量PCR

谷氧还蛋白（glutaredoxin，GLRX），普遍存在于细菌、病毒和哺乳动物体内，其表达受干扰素（interferon，IFN）调控。人谷氧还蛋白有两种类型GLRX1和GLRX2，其中GLRX1分子量为12 kDa，由106～107个氨基酸残基组成，参与组成巯基-二硫键氧化还原酶家族，依靠谷胱甘肽（GSH）将氧化状态的蛋白质二硫键还原为巯基，从而对蛋白进行修复。大量研究表明GLRX1是一种具有多种生物学功能的多效性细胞因子，与调节氧化还原反应、细胞生长和抑制凋亡有密切关系，与人类某些疾病，如AIDS和细菌感染等的发生、发展也相关。

本实验室前期研究发现GLRX1可能是一种重要的抗病毒因子，但是其抗病毒作用的机制却没有相关报道。……