白　宇，李培德，胡景炎，何　杰，陈欢利，吴春琴，金俊杰

（温州科技职业学院，温州 325006）

弓形虫卵囊壁蛋白OWP1的重组表达和特异性单克隆抗体制备

白宇，李培德，胡景炎，何杰，陈欢利，吴春琴，金俊杰

（温州科技职业学院，温州 325006）

为研究制备弓形虫卵囊壁蛋白和特异性单克隆抗体，以弓形虫弱毒株ME49株DNA为模板，应用PCR技术扩增卵囊壁蛋白OWP1基因，将其克隆至原核表达载体构建重组表达质粒 pET-28a-OWP1，经过IPTG 诱导表达和His纯化树脂纯化重组蛋白His-OWP1。重组蛋白His-OWP1作为免疫原，免疫7周龄雌性BALB/c小鼠，重组蛋白GST-OWP1作为检测筛选抗原，应用淋巴细胞杂交瘤技术制备弓形虫卵囊壁蛋白OWP1的单克隆抗体。结果表明，获得2株稳定分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株（4A2和2C10）。Western blot结果表明研究制备的单克隆抗体能够识别重组表达蛋白。制备获得的2株稳定性好、效价高的单克隆抗体，可为今后研究特异敏感的弓形虫病血清学检测方法提供材料。

弓形虫；卵囊壁蛋白1；重组表达；单克隆抗体

弓形虫病（Toxoplasmosis）是由刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）引起的一种呈世界性分布的人畜共患寄生虫病。弓形虫属顶端复合物亚门、孢子虫纲、真球虫目的细胞内寄生性原虫。在其生活史中总共分为滋养体、包囊、裂殖体、配子体和卵囊5种形态，在终宿主（猫与猫科动物）体内，上述5种形态俱存[1]。人类弓形虫感染率极高，全球有20%～50%的人感染弓形虫[2]。我国平均弓形虫阳性率为7.88%，部分地区有逐渐升高的趋势[3]。弓形虫对于免疫抑制或免疫功能低下人群可引起严重的疾病。……