日本血吸虫C1q结合蛋白基因的克隆表达及其免疫保护效果评估
2016-11-22贾秉光柴淑梅曹晓丹宰金丽林矫矫傅志强
贾秉光,洪 炀,韩 倩,吕 超,王 涛,柴淑梅,曹晓丹,陆 珂,宰金丽,马 帅,林矫矫,2,傅志强
(1.中国农业科学院上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200241;2. 江苏省动物重要疾病与人兽共患病防控协同创新中心,扬州 225009)
日本血吸虫C1q结合蛋白基因的克隆表达及其免疫保护效果评估
贾秉光1,洪炀1,韩倩1,吕超1,王涛1,柴淑梅1,曹晓丹1,陆珂1,宰金丽1,马帅1,林矫矫1,2,傅志强1
(1.中国农业科学院上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200241;2. 江苏省动物重要疾病与人兽共患病防控协同创新中心,扬州 225009)
本研究利用PCR技术扩增到日本血吸虫C1qBP基因,构建了重组表达质粒pET-32a(+)-SjC1qBP,并在大肠杆菌中进行表达。将重组蛋白免疫小鼠评估其免疫保护效果,采用Western blot检测其免疫原性,ELISA检测其特异性抗体水平,应用补体溶血试验分析重组蛋白对补体溶血的抑制效果。结果显示日本血吸虫C1qBP基因含729 bp的编码序列,在大肠杆菌中BL21(DE3)中表达后,用His-Bind亲和层析纯化可获得50 kDa的重组蛋白rSjC1qBP。应用重组蛋白rSjC1qBP免疫BALB/c小鼠可产生较高水平的特异性IgG抗体,诱导36.08%的减虫率和43.45%的肝脏减卵率;补体溶血试验结果表明该重组蛋白能够抑制补体溶血。本研究结果为进一步研究日本血吸虫SjC1qBP的生物学功能奠定了基础。
日本血吸虫;C1qBP基因;补体;重组蛋白
日本血吸虫病是由日本分体吸虫(又称日本血吸虫,Schistosoma japonicum,Sj)感染引起一种分布广泛、危害严重的人畜共患寄生虫病[1]。血吸虫尾蚴通过皮肤感染哺乳动物宿主后,在宿主体内的移行、发育、寄生过程中始终遭受宿主的免疫攻击,但相当比例的虫体能够逃避宿主的免疫攻击且发育成熟。……
