李　静，庞欢瑛，简纪常，鲁义善，汤菊芬，吴灶和

（1.广东海洋大学水产学院，广东　湛江　524088；2.广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室，广东 湛江　524088；3.广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室，广东　湛江　524088；4.仲恺农业工程学院，广东　广州　510225）

溶藻弧菌III型分泌系统vscP基因的克隆与生物信息学分析

李静1，2，3，庞欢瑛1，2，3，简纪常1，2，3，鲁义善1，2，3，汤菊芬1，2，3，吴灶和2，3，4

（1.广东海洋大学水产学院，广东湛江524088；2.广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室，广东 湛江524088；3.广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室，广东湛江524088；4.仲恺农业工程学院，广东广州510225）

根据NCBⅠ上登录的溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）全基因组序列，设计一对克隆溶藻弧菌HY9901株ⅠⅠⅠ型分泌系统“分子尺”蛋白 VscP全长基因的特异性引物，PCR扩增获得基因的全长片段。结果显示，vscP（GenBank登录号FR780678）开放阅读框ORF为1 206 bp，共编码401个氨基酸残基。根据推导的氨基酸序列预测其分子质量约为44.4 ku，等电点为5.72。Signal 4.1 Server和TMHMM Server 2.0预测结果表明，VscP无信号肽与跨膜结构域。SoftBerry-Psite预测结果显示，VscP含有3个N端糖基化位点，2个cAMP及cGMP依赖性蛋白激酶磷酸化位点，5个蛋白激酶C磷酸化位点，9个酪蛋白激酶ⅠⅠ磷酸化位点，2个N端豆蔻酰基化位点，1个酰胺化位点和3个微体C末端靶信号位点。运用MEGA6.0构建的VscP系统进化树显示，溶藻弧菌VscP与副溶血弧菌（V.parahaemolyticus）聚为一簇。应用SWⅠSS-MODEL软件构建VscP亚基三维结构模型发现，其与鞭毛FilK蛋白有相似构型。

溶藻弧菌；ⅠⅠⅠ型分泌系统；基因克隆；生物信息学分析；vscP

溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）是一种嗜盐嗜温型的革兰阴性细菌，可引起鱼、虾、贝等养殖动物鳍间组织溃烂、表皮出血、肾脏发白、肝胰脏肿大充血等病变［1］。……