杨路存 刘何春 周学丽 徐文华 周国英*

(1.中国科学院西北高原生物研究所，810008； 2.中国科学院藏药研究重点实验室，西宁 810008； 3.中国科学院大学，北京 100049； 4.青海省铁卜加草原改良试验站，西宁 810008)

* 通信作者：E-mail:zhougy@nwipb.cas.cn

羌活(Notopterygiumincisum)nrDNAITS和cpDNArpl20-rps12序列分子进化特点的分析

杨路存1,2刘何春1,3周学丽4徐文华1,2周国英1,2*

(1.中国科学院西北高原生物研究所，810008；2.中国科学院藏药研究重点实验室，西宁 810008；3.中国科学院大学，北京 100049；4.青海省铁卜加草原改良试验站，西宁 810008)

应用PCR产物直接测序法分析了羌活居群间nrDNA(核糖体DNA)ITS序列和cpDNA(叶绿体DNA)rpl20-rps12的碱基差异，从而初步研究两套植物基因组的变异速率。采用改良的CTAB法从硅胶干燥的羌活叶片中提取总DNA，并对nrDNA ITS和cpDNA rpl20-rps12区域进行扩增、纯化、测序。nrDNAITS序列共有635 bp，有变异位点17处，变异位点百分率为2.68%，(G+C)含量为57.83%。cpDNA rpl20-rps12序列共有767 bp，有变异位点35处，变异位点百分率4.56%，(G+C)含量为33.06%。比较发现，羌活nrDNAITS区域较cpDNA rpl20-rps12序列保守，变异速率较慢。通过对ITS和rpl20-rps12序列单倍型(haplotype)进行分析发现，两者得出的结论一致，即现有分布范围经历了居群近期范围扩张。因此，羌活nrDNA ITS序列适合该种的谱系地理学研究。

羌活；ITS序列；rpl20-rps12序列

羌活(Notopterygiumincisum)隶属于伞形科(Umbelliferae)羌活属(Notopterygium)，是中国的特有种[1～2]。主要分布在青海、甘肃、四川[3]。生于海拔2 500～3 500 m的高山灌木林、亚高山灌丛、草丛及高山林缘地上。羌活与同属的宽叶羌活(N.forbesii)同为药材羌活的基源植物，以根茎及根入药[4]，是中、藏、羌医药体系中常用药材，主要含挥发油和香豆素类成分。具有散寒、祛风、除湿、止痛功效，主治风寒感冒头痛、风湿痹痛等症，现代药理研究表明对心脑血管疾病也有确切疗效[5]。……