曹 维，王文艳

（1.郫县中医医院，四川郫县611730；2.四川省医学科学院四川省人民医院，四川成都610075）

·方法研究·

P2X4受体在高糖介导PC12细胞损伤中的作用及其机制研究

曹 维1，王文艳2

（1.郫县中医医院，四川郫县611730；2.四川省医学科学院四川省人民医院，四川成都610075）

目的 探讨P2X4受体在高糖介导PC12细胞损伤中的作用及其可能的作用机制。方法 通过高糖处理PC12细胞建立拟糖尿病细胞损伤模型，应用MTS比色法检测不同糖浓度对细胞的损伤作用并确定最佳建模浓度。对各组细胞进行不同干预后，通过ELISA方法检测各组细胞上清液中TNF-α和IL-1β的含量；通过qPCR和Western Blot方法检测细胞内P2X4mRNA、受体蛋白和P65蛋白变化。结果 不同糖浓度处理细胞24h后，细胞存活率随糖浓度增大逐渐降低；通过高糖建模并经不同处理发现，与对照组相比，高糖组细胞存活率明显下降，高糖+5-BDBD组与之相比显著上升；通过qPCR和Western Blot检测发现，与对照组相比，高糖组细胞P2X4mRNA、受体蛋白和NF-κB蛋白的表达均明显上升，高糖+5-BDBD组与之相比有所下降，且与对照组无明显差异。结论 P2X4受体参与高糖介导PC12细胞损伤，高糖能诱导PC12细胞NF-κB转录复合体形成，进而介导P2X4受体表达上调，使细胞过度激活并大量释放TNFα、IL-1β等炎性因子对细胞产生毒副作用。

P2X4受体； PC12细胞； 糖尿病； 5-BDBD

糖尿病神经病理性疼痛（diabetic neuropathic pain，DNP）在糖尿病并发症中的发病率约为30%左右，其具体机制尚不明确［1-2］。患者临床表现多为肢体感觉减退、疼痛和麻木等，并伴有自发性疼痛和痛觉过敏现象，严重影响患者的生活质量［3］。DNP与糖尿病患者机体长期处于慢性高血糖状态及其介导各种生理病理状态改变所致的神经系统损伤有关，其中神经细胞损伤是DNP发生的关键［4-5］。……