斯庆图娜拉，李咏梅，刘　磊

(鄂尔多斯市中心医院，内蒙古 鄂尔多斯017000)



蒙药五味清浊散和十味黑冰片散抗幽门螺杆菌的实验研究

斯庆图娜拉，李咏梅*，刘磊

(鄂尔多斯市中心医院，内蒙古 鄂尔多斯017000)

近年来人们已经认识到幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染与慢性胃炎、消化性溃疡、胃MALT淋巴瘤、胃癌甚至还与多种胃肠外疾病的发生密切相关，所以根除Hp治疗也就成为治疗或预防上述疾病的重要手段。但随着抗生素的广泛使用，Hp对抗生素产生耐药性，严重影响了根除效果[1]。因此希望能成功地推出既有治疗、预防效能，又不增加人群耐药性的治疗方法，成为当今国际范围内该研究领域的热点问题。

蒙医对于胃肠疾病的诊治有丰富的经验和很好的疗效。临床上使用蒙药五味清浊散和十味黑冰片散治疗各种胃肠道疾病，其适应症与Hp感染相关性疾病基本一致。笔者通过体外抑菌实验发现五味清浊散和十味黑冰片具有明显的抑制Hp作用，现就有关实验方法及结果报道如下。

1　材料和方法

1.1材料幽门螺杆菌菌株(采集自吉林大学第一医院)，小牛血清(北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司)，电热恒温培养箱(上海博迅实业有限公司)，微需氧罐(Oxid)，幽门螺杆菌培养基(青岛海博生物科技有限公司)，五味清浊散和十味黑冰片散(由鄂尔多斯蒙医研究所提供)。

1.2Hp菌株的分离培养将消化性胃溃疡患者的胃部组织置于布氏肉汤培养基中，匀浆处理，用枪头吸取混液置于培养皿上，L型玻璃棒均匀涂布后，加入微需氧袋，37℃培养5-7天[2，3]，扩增培养。

1.3菌株的鉴定经革兰氏染色、尿素酶检测、触酶试验等标准检测方法鉴定Hp菌株[4]。

1.4蒙药水煎剂的制备分别取五味清浊散和十味黑冰片散各10 g，按比重加10倍的蒸馏水，浸泡30 min后，用文火煎熬30 min过滤。滤渣照上法同样处理2次。将3次滤液混合，蒸发浓缩至1 g/ml，4℃冰箱保存备用。

1.5蒙药对Hp的抑制作用检测布氏肉汤培养基将Hp配置成菌悬液，调整OD值至OD600=0.1-0.2，菌落数为108cfu/ml。药物按照要求制成水煎剂，原始浓度为1 mg/ml,稀释10倍后为筛药的初始浓度。菌液稀释到106cfu/ml后，将药物原始浓度做2倍倍比稀释，共9个浓度梯度，分别为10、5、2.5、1.25、0.75、0.38、0.19、0.09、0.05(mg/100 ml)，将药液与培养基混匀，倒入平板，取菌液30 μl涂板。设置阴性对照组，细菌计数。

1.6测定蒙药对Hp的最低抑菌浓度(MIC) 将平板置于暗色、无反光物体表面上判断试验终点，以抑制细菌生长的最低药物浓度为MIC。

2　结果

图1　蒙药单菌落计数

2.2测定药物MIC五味清浊散MIC50为0.05-0.1 mg/100 ml,十味黑冰片散MIC50为0.05-0.1 mg/100 ml。两种药物的水煎剂对Hp均有一定的抑菌活性，详见图2和图3。药物浓度在1 mg/10 ml时，对Hp的抑制作用最强。

图3十味黑冰片散MIC50

图3十味黑冰片散MIC50

3　讨论

目前临床上使用含两种抗生素的三联疗法或加铋剂的四联疗法根除Hp治疗。但是大剂量抗生素联合应用不仅对人体有毒副作用，扰乱胃肠道的生态平衡，而且还可诱导新的耐药菌株的出现，引发人群耐药性增加等社会问题[5]。近几年人们开始研究天然药物对Hp的抑制作用，并取得了较好的成绩[6-8]。但是到目前为止国内外关于抗Hp的天然药物的研究只局限于中成药。尚未有人关注蒙药对Hp的抑制作用。蒙医认为胃病是因为赫依、希拉引起的胃火衰退或巴达干黏液阻郁脉道而精华不能正常转化引起。长期以来使用五味清浊散和十味黑冰片散为主的蒙药治疗各种胃肠道疾病。五味清浊散由石榴、肉桂、豆蔻、荜茇、红花配合组成。具有温胃益火、化滞除湿、温通脉道、使精华得以正常转化畅行、揭开隐热掩蔽功效，主治精华不消化、巴达干黏液阻郁脉道、食物不能转化精华、寒热合并、胃火衰退等症状[9]。有报道五味清浊散与辛伐他汀联用可有协同降血脂作用[10]。还有实验研究发现五味清浊散可改善脾虚泻小鼠的网状内皮系统中惰性炭粒的吞噬能力和绵羊红细胞致小鼠溶血素抗体生成能力[11]。十味黑冰片散由黑冰片、肉桂、石榴、豆蔻、金柯子、止泻子、木鳖子、荜茇、光明盐、熊胆等配合而成。具有抑赫依、希拉、助消化功效，主治消化不良、痞、口苦、嗳气、胃胀痛等。本研究选用蒙医临床上最常用的两种蒙药，通过体外试验观察蒙药对Hp抑制效应，对临床应用提供试验依据。

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内蒙古自治区自然科学基金项目(2013MS1177)

1007-4287(2016)09-1546-02

斯庆图娜拉(1979-),女，蒙古族，副主任医师，博士研究生，主要从事消化内科疾病的研究。

2015-10-19)