人工抗菌肽MA-D4的原核表达及其生物活性鉴定
2016-10-26刘诚
中国饲料 2016年2期
刘诚
(1.广西大学新闻传播学院,广西南宁530004;2.亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,广西南宁530004)
人工抗菌肽MA-D4的原核表达及其生物活性鉴定
刘诚1,2*
(1.广西大学新闻传播学院,广西南宁530004;2.亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,广西南宁530004)
为研究人工抗菌肽MA-D4的高效制备方法,检测其体外生物活性,探索该抗菌肽作为新型抗菌药物的应用前景和开发潜力,本试验设计人工抗菌肽MA-D4的氨基酸序列,并采用大肠杆菌偏嗜性密码子设计编码该抗菌肽的核苷酸序列;采取重叠区扩增基因拼接法合成目的基因,构建原核表达载体,并转化至大肠杆菌中诱导表达;表达产物经肠激酶酶切处理和镍离子亲和层析纯化后,进行体外生物活性检测。结果表明,人工抗菌肽MA-D4具备较强的广谱抗菌活性,可抑制革兰氏阳性菌和阴性菌,同时不具有溶血活性。综上所述,人工抗菌肽MA-D4在食品防腐、疾病治疗等方面具有良好的应用前景,极具开发潜力。
抗菌肽;MA-D4;原核表达;生物活性
抗菌肽是一类由宿主产生的能够抵抗外界病原体感染的小分子多肽,是生物天然免疫防御系统的重要组成部分,由特定基因编码产生,具有广谱抗菌活性(刘诚等,2011)。抗菌肽广泛存在于各种生物体内,在微生物、植物和动物体中均有发现并成功分离获得。但生物体内抗菌肽含量较低,直接提取的工艺要求高、难度大,无法应用于规模化生产。人工化学合成虽可获得与天然抗菌肽一致的氨基酸序列,但是常常不能形成正确的空间结构,且因成本昂贵,使其目前仅停留在实验室试验阶段。……
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